培養されたヒラメのパラリヒティオリバセウスから分離されたリンパ球ウイルスの感染と伝播草の毛皮株

中国の培養されたヒラメparalichthys olivaceusで頻繁に発生するリンパ球性疾患の原因物質は、リンパ球ウイルス（LV）です。この研究では、13の魚細胞株がLVに対する感受性についてテストされました。これらのうち、淡水草のコイctenopharyngodon idellusに由来する2つの細胞株は、LVの影響を受けやすく、したがって1つの細胞株（草の卵巣）が使用され、ウイルスを再現して伝播しました。明らかな細胞障害効果（CPE）は、接種後1日で細胞単層で最初に観察され、3日間でこれは細胞単層の約75％に拡張されました。ただし、4日後にはそれ以上のCPE拡張は観察されませんでした。LVによって誘導される細胞障害性特性は、Giemsa染色とHoechst 33258染色による蛍光顕微鏡観察によって検出されました。伝播されたウイルス粒子は、電子顕微鏡でも観察されました。超微細構造分析により、クロマチン圧縮とマーギネーション、小胞形成、細胞表面畳み込み、核断片化、特徴的な「ブレブ」と細胞融合の発生など、いくつかの異なる細胞の変化が明らかになりました。この研究は、淡水魚細胞株におけるLV感染と伝播の詳細な報告を提供し、感染した細胞におけるウイルスの伝播に関する直接的な電子顕微鏡の証拠を提示します。CPEが制御される可能性のあるプロセスが提案されています。

The causative agent of lymphocystis disease that frequently occurs in cultured flounder Paralichthys olivaceus in China is lymphocystis virus (LV). In this study, 13 fish cell lines were tested for their susceptibility to LV. Of these, 2 cell lines derived from the freshwater grass carp Ctenopharyngodon idellus proved susceptible to the LV, and 1 cell line, GCO (grass carp ovary), was therefore used to replicate and propagate the virus. An obvious cytopathic effect (CPE) was first observed in cell monolayers at 1 d post-inoculation, and at 3 d this had extended to about 75% of the cell monolayer. However, no further CPE extension was observed after 4 d. Cytopathic characteristics induced by the LV were detected by Giemsa staining and fluorescence microscopic observation with Hoechst 33258 staining. The propagated virus particles were also observed by electron microscopy. Ultrastructure analysis revealed several distinct cellular changes, such as chromatin compaction and margination, vesicle formation, cell-surface convolution, nuclear fragmentation and the occurrence of characteristic 'blebs' and cell fusion. This study provides a detailed report of LV infection and propagation in a freshwater fish cell line, and presents direct electron microscopy evidence for propagation of the virus in infected cells. A possible process by which the CPEs are controlled is suggested.