[免疫グロブリン重鎖フレームワーク領域由来の抗原性非ペプチドによって誘導される特定の細胞毒性Tリンパ球の増殖]

目的：免疫グロブリン重鎖フレームワーク領域由来ペプチドが細胞毒性Tリンパ球エピトープとして機能することを特定する。 方法：7つのIGHV遺伝子ファミリーがPCRによってそれぞれ増幅され、108の急性リンパ芽球性白血病症例について直接配列決定されました。利用可能な配列は、アミノ酸配列に翻訳されました。IGHV遺伝子の組換えパターンと遺伝子変異の分析には、バイオインフォマティクスが適用されました。ソフトウェアSyfpeithiとBIMAは、免疫グロブリン重鎖可変領域のT細胞エピトープを予測するために使用されました。予測されたペプチドが免疫原性を持っているかどうかを判断するために、このペプチドのIGHV1ファミリーQlVqsgaevを表現として合成し、このペプチドのT2結合アッセイを実施し、QLVQSGAEV-QLVQSGSGSGAEV-sgaev-sgaev-sgaev-cgsgaev-sgaev-cgsgaev-cgsgaev-pbls（pbls）からの正常なHLA-A * 0201末梢血リンパ球（PBLS）からのT細胞の増殖を誘導しました。負荷抗原提示細胞、およびHLA-A * 0201/QLVQSGAEV四量体による増殖T細胞の検出。 結果：66％の症例で完全なIGHV遺伝子再配列が特定されました。利用可能な40個のB-AGHVシーケンスのうち、26個がHLA-A * 0201分子に結合する可能性が高い抗原性非アペプチドについて予測されました。12個のペプチドが獲得されました。CDR3に由来する1つのペプチドを除き、10（83％）ペプチドは免疫グロブリン重鎖フレームワーク領域にありました。さらに、同じIGHVファミリーに属するB -ALLは、1〜2ペプチドを共有しました。合成されたペプチドQLVQSGAEVアップ制御HLA-A * 0201発現T2細胞表面で1.63回。通常のHLA-A * 0201ドナーからのPBLは、QLVQSGAEV搭載自己PBMCSおよびT2で刺激され、ゲートリンパ球球体のCD8（+）テトラマー（+）テトラマー（+）細胞は、最初の刺激後の1.64％から1.64％から3回目の刺激後の82.57％に増加しました。。 結論：免疫グロブリン重鎖フレームワーク領域遺伝子は、CTLによって認識されたIGIVファミリー特異的ペプチドをコードします。特定のCTLは、ヒト末梢T細胞レパートリーに残ります。免疫グロブリン重鎖フレームワーク由来ペプチドは、特定のCTLの増殖を誘導するためのT細胞エピトープとして機能します。

OBJECTIVE: To identify that immunoglobulin heavy chain framework regions-derived peptides function as cytotoxic T lymphocytes epitopes. METHODS: Seven IgHV gene families were respectively amplified by PCR and directly sequenced for 108 acute lymphoblastic leukemia cases. Sequences available were translated into amino acid sequences. Bioinformatics were applied for analyzing recombination patterns and gene mutations of the IgHV genes. Softwares SYFPEITHI and BIMAS were used for predicting the T cell epitopes in the immunoglobulin heavy chain variable regions. To determine whether the predicted peptides have immunogenicity, a IgHV1 family nonapeptide QLVQSGAEV was synthesized as a representation and T2 binding assay of this peptide was performed, inducing proliferation of T cells from normal HLA-A * 0201 peripheral blood lymphocytes (PBLs) with QLVQSGAEV-loaded antigen presenting cells, and detecting the proliferating T cells by HLA-A * 0201/QLVQSGAEV tetramers. RESULTS: Complete IgHV gene rearrangements were identified in 66% cases. Among 40 B-ALL IgHV sequences available, 26 were predicted for antigenic nonapeptides that are likely to bind to HLA-A * 0201 molecule. Twelve peptides were acquired. Except one peptide derived from CDR3, 10 (83%) peptides were located in the immunoglobulin heavy chain framework regions. Moreover B-ALL belonging to the same IgHV family shared 1 - 2 peptides. Synthesized peptide QLVQSGAEV up-regulated HLA-A * 0201 expression 1.63 times on T2 cell surface. PBLs from a normal HLA-A * 0201 donor were stimulated with QLVQSGAEV-loaded autologous PBMCs and T2, the CD8(+) tetramer(+) cells in gated lymphocyte population increased from 1.64% after the first stimulation to 82.57% after the third stimulation. CONCLUSION: Immunoglobulin heavy chain framework region genes encode IgHV family-specific peptides recognized by CTLs. Specific CTLs remain in human peripheral T cell repertoire. Immunoglobulin heavy chain framework-derived peptides function as T cell epitopes to induce the proliferation of specific CTLs.