糖質コルチコイド受容体のアゴニストおよびアンタゴニスト複合体とのコアプッレスおよびコアクチベーターの平衡相互作用

CorePressorsと同アクティベーターは、無傷の細胞でそれぞれアゴニストと拮抗薬ステロイドと複合したグルココルチコイド受容体（GRS）の用量反応曲線と部分的なアゴニスト活性を調節することができます。最近、GR-Antagonist複合体がCoactivator TIF2（転写中間因子因子2）に結合することを報告しました。これは、GR複合体との直接的な相互作用によって媒介されるコアクチベーターの全細胞効果と一致しています。ここで、CorePressorsの全細胞変調活性がGR-アゴニストとアンタゴニスト複合体の両方への結合を伴うかどうか、およびCorePressorsとCoactivatorsとGR複合体との関連が競合する平衡反応を伴うかどうかを尋ねます。2つの異なる細胞株を伴う哺乳類の2ハイブリッドアッセイと、細胞のないプルダウンおよび全細胞免疫沈降アッセイでは、コアプレス因子NCOR（核受容体コアプレッサー）およびSMRT（レチノイドおよび甲状腺ホルモン受容体のサイレンシングメディエーター）とアゴニストとの関連と関連しています。GRSの拮抗薬複合体。GRのNおよびC末端領域の両方が、コアプレス因子結合に必要です。これには、他の核/ステロイド受容体へのコアプレス装置の結合を媒介するcornRボックスモチーフが必要です。重要なことに、CorePressorsとの全細胞GR相互作用は、過剰なコアクチベーターによって競争力があり、その逆も同様です。ただし、CorepressorおよびCoactivatorへのGR結合を競うCoactivator TIF2の領域は同じではなく、CoactivatorsおよびCorepressorsとのGR関連の分子の違いを意味します。最後に、コアクチベーターとコアプレッサーとの全細胞比が、外因性甲状腺受容体ベータ+/-甲状腺ホルモンへの選択的補因子結合によって変化すると、GR用量応答飼育および部分的なアゴニスト活性が適切に修正されます。このような修飾は、ヒストンのアセチル化とは無関係です。コルプレッサーとコアクチベーターの相互に拮抗する平衡相互作用は、これら2つのクラスの補因子の細胞内比に反応する方法で、GR複合体の用量反応曲線と部分アゴニスト活性を調節すると結論付けています。この変調は、発達、分化、恒常性、および内分泌療法中の遺伝子発現の微分制御の魅力的なメカニズムを提供します。

Corepressors and coactivators can modulate the dose-response curve and partial agonist activity of glucocorticoid receptors (GRs) complexed with agonist and antagonist steroids, respectively, in intact cells. We recently reported that GR-antagonist complexes bind to the coactivator TIF2, (transcriptional intermediary factor 2), which is consistent with the whole-cell effects of coactivators being mediated by direct interactions with GR complexes. We now ask whether the whole-cell modulatory activity of corepressors also entails binding to both GR-agonist and -antagonist complexes and whether the association of corepressors and coactivators with GR complexes involves competitive equilibrium reactions. In mammalian two-hybrid assays with two different cell lines and in cell-free pull-down and whole-cell immunoprecipitation assays, the corepressors NCoR (nuclear receptor corepressor) and SMRT (silencing mediator of retinoid and thyroid hormone receptor) associate with agonist and antagonist complexes of GRs. Both N- and C-terminal regions of GR are needed for corepressor binding, which requires the CoRNR box motifs that mediate corepressor binding to other nuclear/steroid receptors. Importantly, whole-cell GR interactions with corepressors are competitively inhibited by excess coactivator and vice versa. However, the regions of the coactivator TIF2 that compete for GR binding to corepressor and coactivator are not the same, implying a molecular difference in GR association with coactivators and corepressors. Finally, when the whole-cell ratio of coactivators to corepressors is altered by selective cofactor binding to exogenous thyroid receptor beta +/- thyroid hormone, the GR dose-response-curve and partial agonist activity are appropriately modified. Such modifications are independent of histone acetylation. We conclude that mutually antagonistic equilibrium interactions of corepressors and coactivators modulate the dose-response curve and partial agonist activity of GR complexes in a manner that is responsive to the intracellular ratio of these two classes of cofactors. This modulation provides an attractive mechanism for differential control of gene expression during development, differentiation, homeostasis, and endocrine therapies.