Chlamydomonas ReinhardtiiのCPH1遺伝子は、光誘発性タンパク質分解によってレベルが制御される2つの形態のクリプトクロムをコードします

クリプトクロムはDNAフォトリアーゼに関連するタンパク質であり、青色光受容体として機能し、植物と動物の両方で概日リズムで重要な役割を果たすことが示されています。Chlamydomonas reinhardtiiのCPH1遺伝子は、91 kdの予測分子量を持つ867アミノ酸の推定上のクリプトクロムタンパク質をコードすると予測されていました（Small et al。、1995）。しかし、CPH1タンパク質に特異的な抗体を使用したウエスタンブロッティングにより、約126および143 kdの見かけの分子量で移動する2つのタンパク質の存在が明らかになりました。割り当てられたイントロン - エキソンの境界の再審査は、以前に割り当てられたイントロン7が実際にはエクソン7の一部であり、104.6 kdのサイズに対応する1,007アミノ酸の予測タンパク質につながることを示しています。SDS-PAGEでより遅く移動するCPH1の2つの形態は、おそらく翻訳後の未知の修正に起因すると考えられます。C. reinhardtii細胞では、光から暗いサイクルによって同期されたChph1タンパク質の2つの遅い移動型が暗所に蓄積し、光の中で急速に消えます。赤と青の両方の光は、CPH1タンパク質の分解を誘導するのに効果的です。プロテアソーム阻害剤であるMG132によって分解が阻害されるため、プロテアソームは関係しています。欠失変異体を用いた研究は、C末端領域が、明るい条件と暗い条件の両方での翻訳後修飾とタンパク質の安定性の両方にとって重要であることを示しています。

Cryptochromes are proteins related to DNA photolyases and have been shown to function as blue-light photoreceptors and to play important roles in circadian rhythms in both plants and animals. The CPH1 gene from Chlamydomonas reinhardtii was originally predicted to encode a putative cryptochrome protein of 867 amino acids with a predicted molecular mass of 91 kD (Small et al., 1995). However, western blotting with antibodies specific to the CPH1 protein revealed the presence of two proteins that migrate at apparent molecular mass of approximately 126 and 143 kD. A reexamination of the assigned intron-exon boundaries has shown that the previously assigned intron 7 is in fact part of exon 7 which leads to a predicted protein of 1,007 amino acids corresponding to a size of 104.6 kD. The two forms of CPH1 that migrate slower on SDS-PAGE presumably result from unknown posttranslational modifications. In C. reinhardtii cells synchronized by light to dark cycles, the two slow migrating forms of CPH1 protein accumulate in the dark and disappear rapidly in the light. Both red and blue light are effective at inducing the degradation of the CPH1 proteins. Proteasomes are implicated because degradation is inhibited by MG132, a proteasome inhibitor. Studies with deletion mutants indicate that the C-terminal region is important for both the posttranslational modification and the protein's stability under both light and dark conditions.