E2F依存性ヒストンアセチル化とTIP60アセチルトランスフェラーゼ複合体のChromatinへの後期G1への動員

E2Fタンパク質は、転写を活性化または抑制することができます。マイトジェン性刺激後、抑制性E2F4 -P130ヒストンのデアセチラーゼ複合体は、標的プロモーターと関連する種（E2F1、-2、および-3）から解離します。ヒストンH3とH4は同時に高アセチル化されますが、これが前提条件であるか、E2F結合の結果であるかは不明のままです。ここでは、ヒト細胞における標的クロマチンの高アセチル化には、活性化E2F種が必要であることを示しています。血清刺激T98G細胞におけるドミナントネガティブ（DN）E2F1変異体の過剰発現は、すべてのE2F結合、H4アセチル化、および部分的にはH3アセチル化をブロックしました。標的遺伝子の活性化とS相の侵入もDN E2F1によってブロックされました。逆に、E2F1の異所性活性化はH3およびH4アセチル化を急速に誘導し、これらのイベントにおけるE2Fの直接的な役割を示しています。E2F1は、ヒストンアセチルトランスフェラーゼ（HATS）P300/CBPおよびPCAF/GCN5に以前に結合することが以前に示されていました。私たちの手の中で、異所に発現したE2F1は、無関係なHAT TIP60を結合し、TIP60複合体（TIP60、TRRAP、P400、TIP48、およびTIP49）の5つのサブユニットをin vivoで標的プロモーターに誘導しました。さらに、クロマチンに対するTIP60のE2F依存性動員は、血清刺激後の後期G（1）で発生しました。複数のHAT複合体の活性は、E2F依存性のアセチル化、転写、およびS期の侵入を説明すると推測します。

E2F proteins can either activate or repress transcription. Following mitogenic stimulation, repressive E2F4-p130-histone deacetylase complexes dissociate from, while activating species (E2F1, -2, and -3) associate with, target promoters. Histones H3 and H4 simultaneously become hyperacetylated, but it remains unclear whether this is a prerequisite or a consequence of E2F binding. Here, we show that activating E2F species are required for hyperacetylation of target chromatin in human cells. Overexpression of a dominant-negative (DN) E2F1 mutant in serum-stimulated T98G cells blocked all E2F binding, H4 acetylation, and, albeit partially, H3 acetylation. Target gene activation and S-phase entry were also blocked by DN E2F1. Conversely, ectopic activation of E2F1 rapidly induced H3 and H4 acetylation, demonstrating a direct role for E2F in these events. E2F1 was previously shown to bind the histone acetyltransferases (HATs) p300/CBP and PCAF/GCN5. In our hands, ectopically expressed E2F1 also bound the unrelated HAT Tip60 and induced recruitment of five subunits of the Tip60 complex (Tip60, TRRAP, p400, Tip48, and Tip49) to target promoters in vivo. Moreover, E2F-dependent recruitment of Tip60 to chromatin occurred in late G(1) following serum stimulation. We speculate that the activities of multiple HAT complexes account for E2F-dependent acetylation, transcription, and S-phase entry.