C型肝炎ウイルス糖タンパク質E2には、E1E2糖タンパク質ヘテロダイマー化とウイルス侵入に不可欠な膜プシカミタッドリピート配列が含まれています。

C型肝炎ウイルスのE1およびE2糖タンパク質は、ウイルス侵入を媒介する非共有関連のヘテロダイマーを形成します。糖タンパク質E2は、疎水性ヘプトードリピート（残基675-699）を含む高度に保存された配列を介して、膜貫通ドメイン（残基716-746）に接続された受容体結合ドメイン（残基384-661）を含む。E2 HEPTADリピートのアラニンおよびプロリンスキャン変異誘発により、LEU675、Ser678、Leu689、およびLeu692がE1E2ヘテロ二量体化に重要であることが明らかになりました。さらに、ヘテロ二量体化への影響に関係なく、1つのヘプタッドリピート残基（Ser678）のすべてのPROおよびALA置換は、E1E2-HIV-1偽型のHuH7細胞への侵入をブロックしました。Heptadの連続したB位置を占める2つの保存されたプロリン（Pro676およびPro683）は、E1E2ヘテロ二量体化には必要ありませんでした。ただし、Pro683はウイルス侵入にとって重要でした。したがって、位置683でのプロリンによる予測されたアルファヘリカル構造の破壊は、E2機能にとって重要です。すべての変異体がCD81の大きな細胞外ループの組換え型と相互作用できるため、変異体がウイルス侵入を媒介することができないことは、受容体結合機能の喪失によっては説明されませんでした。E1およびE2エクトドメインとフラビウイルスPRMおよびE糖タンパク質の膜貫通ドメインの間に形成されたキメラは、野生型E1E2と比較して効率が低いものの、それぞれヘテロ二量体化することができました。したがって、E2のHEPTADリピートには、完全なヘテロ二量体化とウイルス侵入関数のためにネイティブ膜貫通ドメインが必要です。我々のデータは、E2の膜形態近位のヘプタッド繰り返しが、フラビウイルスE糖タンパク質の茎と機能的に相同性であることを示しています。E2には、クラスII融合タンパク質と共通の機械的特徴があることを提案します。

The E1 and E2 glycoproteins of hepatitis C virus form a noncovalently associated heterodimer that mediates viral entry. Glycoprotein E2 comprises a receptor-binding domain (residues 384-661) that is connected to the transmembrane domain (residues 716-746) via a highly conserved sequence containing a hydrophobic heptad repeat (residues 675-699). Alanine- and proline-scanning mutagenesis of the E2 heptad repeat revealed that Leu675, Ser678, Leu689, and Leu692 are important for E1E2 heterodimerization. Furthermore, Pro and Ala substitution of all but one heptad repeat residue (Ser678) blocked the entry of E1E2-HIV-1 pseudotypes into Huh7 cells, irrespective of an effect on heterodimerization. Two conserved prolines (Pro676 and Pro683), occupying consecutive b positions of the heptad, were not required for E1E2 heterodimerization; however, Pro683 was critical for viral entry. Thus, disruption of the predicted alpha-helical structure by proline at position 683 is important for E2 function. The inability of mutants to mediate viral entry was not explained by a loss of receptor binding function, because all mutants were able to interact with a recombinant form of the CD81 large extracellular loop. Chimeras formed between the E1 and E2 ectodomains and the transmembrane domains of flavivirus prM and E glycoproteins, respectively, were able to heterodimerize, although with lower efficiency in comparison with wild type E1E2. The heptad repeat of E2 therefore requires the native transmembrane domain for full heterodimerization and viral entry function. Our data indicate that the membraneproximal heptad repeat of E2 is functionally homologous to the stem of flavivirus E glycoproteins. We propose that E2 has mechanistic features in common with class II fusion proteins.