P2Y12、クロピドグレルの標的、新しい血小板ADP受容体

クロピドグレルは、ADP誘発性血小板凝集を阻害する強力な抗血栓薬です。大規模な臨床試験の結果は、症候性アテローム性動脈硬化症の病歴を有する患者の血管虚血イベント（心筋梗塞、脳卒中、血管死）の予防におけるアスピリンに対するクロピドグレルの全体的な利点を実証しています。クロピドグレルの抗凝集効果は、血小板表面に存在するプリン作動性受容体へのADP結合の不可逆的な阻害に起因します。クロピドグレルはin vitroで活性ではなく、肝臓で形成された活性代謝物の前駆体と見なすことができます。この活性代謝産物の化学構造とその生物活性は最近報告されています。いくつかのプリン作動性受容体が血小板で報告されています。P2X（1）、カルシウムチャネル、およびP2Y1 A GQ共役7トランス膜ドメイン受容体は、クロピドグレルに拮抗されていないことがわかっています。別のGI（2）共役受容体（P2Y12と名付けられた）が最近クローン化され、CHO細胞で安定して発現しています。これらの細胞は、ADPの安定した類似体である（33）P-2MES-ADPに対して強い親和性を示しました。その結合特性は、血小板で観察されたものにすべてのポイントに対応していました。これらの細胞への（33）P-2MES-ADPの結合は、血小板上のこの化合物で観察されたものと一致する効力とともに、クロピドグレルの活性代謝物によって強く阻害されました。これらのトランスフェクトCHO細胞では、血小板、ADPおよび2MES-ADPのように、アデニリルシクラーゼのダウンレギュレーションを誘導しました。これは、クロピドグレルの活性代謝物によって阻害された効果です。これらの結果は、この受容体が以前に「P2T」血小板受容体に対応しており、クロピドグレルの活性代謝物がこの受容体に共有結合して結合することを示していることを示しており、それが血小板に対するADPの凝集効果をどのようにブロックするかを説明します。

Clopidogrel is a potent antithrombotic drug that inhibits ADP-induced platelet aggregation. The results of large clinical trials have demonstrated an overall benefit of clopidogrel over aspirin in the prevention of vascular ischemic events (myocardial infarction, stroke, vascular death) in patients with a history of symptomatic atherosclerotic disease. The antiaggregating effect of clopidogrel is attributed to an irreversible inhibition of ADP binding to a purinergic receptor present at the platelet surface. Clopidogrel is not active in vitro and can be considered a precursor of an active metabolite formed in the liver. The chemical structure of this active metabolite and its biological activity have been described recently. Several purinergic receptors have been described on platelets; P2X (1), a calcium channel, and P2Y1 a Gq-coupled seven-transmembrane domain receptor, have been found not to be antagonized by clopidogrel. Another Gi (2)-coupled receptor (named P2Y12) has been recently cloned and stably expressed in CHO cells. These cells displayed a strong affinity for (33)P-2MeS-ADP, a stable analogue of ADP, the binding characteristics of which corresponded in all points to those observed on platelets. The binding of (33)P-2MeS-ADP to these cells was strongly inhibited by the active metabolite of clopidogrel with a potency that was consistent with that observed for this compound on platelets. In these transfected CHO cells, as in platelets, ADP and 2MeS-ADP induced adenylyl cyclase downregulation, an effect that was inhibited by the active metabolite of clopidogrel. These results demonstrate that this receptor corresponds to the previously called "P2t" platelet receptor and show that the active metabolite of clopidogrel binds in a covalent manner to this receptor, thus explaining how it blocks the aggregating effect of ADP on platelets.