腸上皮における組織特異的および誘導性Creを介した組換え

マウス消化上皮における標的遺伝子のCREを介した組換えのための2つの相補系を生成し、CREレポーターマウス株でそれらをテストしました。CREは、マウスビリン遺伝子（VIL-CRE）の9 KB調節領域の制御下で発現しました。遺伝子組換えは、内臓内胚葉の胚日（E）9、および腸上皮全体でE12.5によって開始されましたが、他の組織では開始されませんでした。CRE発現は成人期を通じて維持されました。さらに、ビルリンプロモーターの制御下で発現したタモキシフェン依存性Cre依存性リコンビナーゼ（VIL-CRE-ERT2）を持つトランスジェニックマウスは、標的を絞った空間的に制御された体性組換えを実行するために作成されました。タモキシフェン治療後、消化上皮全体で組換えが検出されました。再結合された遺伝子座は、急速な腸細胞の更新にもかかわらず、タモキシフェンの投与後60日間持続し、上皮前駆細胞が標的にされたことを示しています。Villin-CreおよびVillin-Cre-Ert2マウスは、発達中および成体の腸における細胞系統の配分と遺伝子機能の研究に貴重なツールを提供します。

We generated two complementary systems for Cre-mediated recombination of target genes in the mouse digestive epithelium and tested them with a Cre-reporter mouse strain. Cre was expressed under the control of a 9 kb regulatory region of the murine villin gene (vil-Cre). Genetic recombination was initiated at embryonic day (E) 9 in the visceral endoderm, and by E12.5 in the entire intestinal epithelium, but not in other tissues. Cre expression was maintained throughout adulthood. Furthermore, transgenic mice bearing a tamoxifen-dependent Cre recombinase (vil-Cre-ERT2) expressed under the control of the villin promoter were created to perform targeted spatiotemporally controlled somatic recombination. After tamoxifen treatment, recombination was detectable throughout the digestive epithelium. The recombined locus persisted for 60 days after tamoxifen administration, despite rapid intestinal cell renewal, indicating that epithelial progenitor cells had been targeted. The villin-Cre and villin-Cre-ERT2 mice provide valuable tools for studies of cell lineage allocation and gene function in the developing and adult intestine.