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最近の証拠は、哺乳類の生殖の多くのイベントにおける急性期タンパク質ハプトグロビンの関与を支持しています。この研究の目的は、ハプトグロビンmRNAがウシの卵巣および卵管で発現したかどうかを判断し、生殖組織および肝臓におけるハプトグロビンmRNAの発現がウシの発熱サイクルの特定の段階と関連しているかどうかを評価することでした。エストラスは、プロスタグランジン注射によりホルスタイン牛で同期し、卵形サイクルの黄体および周囲の段階で組織が収集されました。総RNAを分離し、ヒト、ラット、マウスのハプトグロビン配列の類似性の領域に対して設計されたプライマーを使用して、逆転写ポリメラーゼ連鎖反応(RT-PCR)を実行しました。ハプトグロビンmRNAの発現は、卵管細胞と肝臓の両方の段階で卵管細胞と肝臓で検出されましたが、卵巣濾胞細胞では検出されませんでした。302 bp PCR産物は、報告された霊長類ハプトグロビンシーケンスと82〜83%のアイデンティティを共有することを決定しました。ノーザンブロッティングによる分析により、卵管および肝臓の1.2および1.4 kbのハプトグロビンmRNA転写産物が明らかになり、肝臓のハプトグロビンmRNA発現は、黄体牛よりも周囲の繁殖牛(4/4)で基底レベルを上回っていることが示されました(1/4/4)5)。ハプトグロビンcDNAをクローン化し、in vitroで転写して、その場でのハイブリダイゼーションのプローブを生成しました。ハプトグロビンmRNAは肝臓で検出されましたが、卵巣または卵管では検出されませんでした。ウシ肝臓におけるハプトグロビンmRNA発現は、発情サイクルの侵入段階で上方制御され、ウシ卵管が低レベルのハプトグロビンmRNAを構成的に発現すると結論付けています。ハプトグロビンmRNA発現のこの時間的パターンは、繁殖組織を、周囲の侵入段階で血清ハプトグロビンの濃度の上昇にさらし、この期間中に発生する生殖イベントではハプトグロビンが重要である可能性があることを示唆しています。
最近の証拠は、哺乳類の生殖の多くのイベントにおける急性期タンパク質ハプトグロビンの関与を支持しています。この研究の目的は、ハプトグロビンmRNAがウシの卵巣および卵管で発現したかどうかを判断し、生殖組織および肝臓におけるハプトグロビンmRNAの発現がウシの発熱サイクルの特定の段階と関連しているかどうかを評価することでした。エストラスは、プロスタグランジン注射によりホルスタイン牛で同期し、卵形サイクルの黄体および周囲の段階で組織が収集されました。総RNAを分離し、ヒト、ラット、マウスのハプトグロビン配列の類似性の領域に対して設計されたプライマーを使用して、逆転写ポリメラーゼ連鎖反応(RT-PCR)を実行しました。ハプトグロビンmRNAの発現は、卵管細胞と肝臓の両方の段階で卵管細胞と肝臓で検出されましたが、卵巣濾胞細胞では検出されませんでした。302 bp PCR産物は、報告された霊長類ハプトグロビンシーケンスと82〜83%のアイデンティティを共有することを決定しました。ノーザンブロッティングによる分析により、卵管および肝臓の1.2および1.4 kbのハプトグロビンmRNA転写産物が明らかになり、肝臓のハプトグロビンmRNA発現は、黄体牛よりも周囲の繁殖牛(4/4)で基底レベルを上回っていることが示されました(1/4/4)5)。ハプトグロビンcDNAをクローン化し、in vitroで転写して、その場でのハイブリダイゼーションのプローブを生成しました。ハプトグロビンmRNAは肝臓で検出されましたが、卵巣または卵管では検出されませんでした。ウシ肝臓におけるハプトグロビンmRNA発現は、発情サイクルの侵入段階で上方制御され、ウシ卵管が低レベルのハプトグロビンmRNAを構成的に発現すると結論付けています。ハプトグロビンmRNA発現のこの時間的パターンは、繁殖組織を、周囲の侵入段階で血清ハプトグロビンの濃度の上昇にさらし、この期間中に発生する生殖イベントではハプトグロビンが重要である可能性があることを示唆しています。
Recent evidence supports involvement of the acute phase protein haptoglobin in numerous events of mammalian reproduction. The objective of this study was to determine whether haptoglobin mRNA was expressed in the bovine ovary and oviduct, and to evaluate whether expression of haptoglobin mRNA in reproductive tissues and liver was associated with a specific phase of the bovine oestrous cycle. Oestrus was synchronized in Holstein cows by prostaglandin injection and tissues were collected during the luteal and peri-oestrous stages of the oestrous cycle. Total RNA was isolated and reverse-transcription polymerase chain reaction (RT-PCR) was performed using primers designed against regions of similarity in human, rat and mouse haptoglobin sequences. Haptoglobin mRNA expression was detected in oviductal cells and liver, during both stages of the oestrous cycle, but not in ovarian follicular cells. The 302 bp PCR product was determined to share 82-83% identity with reported primate haptoglobin sequences. Analysis by Northern blotting revealed 1.2 and 1.4 kb haptoglobin mRNA transcripts in the oviduct and liver, and indicated that hepatic haptoglobin mRNA expression was elevated above basal levels in a greater proportion of peri-oestrous cows (4/4) than luteal cows (1/5). Haptoglobin cDNA was cloned and in vitro transcribed to generate probes for in situ hybridization. Haptoglobin mRNA was detected in the liver, but not in the ovary or oviduct. We conclude that haptoglobin mRNA expression in the bovine liver is up-regulated during the peri-oestrous phase of the oestrous cycle, and that the bovine oviduct expresses a low level of haptoglobin mRNA constitutively. This temporal pattern of haptoglobin mRNA expression would expose reproductive tissues to elevated concentrations of serum haptoglobin during the peri-oestrous stage, and suggests that haptoglobin may be important in reproductive events occurring during this time period.
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