ペルオキシナイトライトによる星状細胞における神経成長因子の発現の刺激

背景：一酸化窒素（NO）の過剰生産は、神経毒性の主要なメカニズムとして認識されています。スーパーオキシドとは反応して、強い酸化および硝化種であるペルオキシニトライトを生成します。ペルオキシシニトライトは、グリア細胞で形成され、筋萎縮性側索硬化症（ALS）を含む神経病理学的状態でニューロンを変性させます。ALSでは、運動ニューロンはp75ニューロトロフィン受容体（P75NTR）を再発現し、NGFに対して脆弱になる可能性があります。本研究では、脊髄星状細胞におけるペルオキシニトライトが神経成長因子（NGF）発現を刺激したかどうかを調査しました。 材料と方法：星状細胞の単層がペルオキシニトライトにさらされ、ニトロチロシンの形成は免疫蛍光により決定されました。NGF、脳由来の好中球因子（BDNF）および線維芽細胞成長因子-2（FGF-2）のmRNAレベルは、半定量的RT-PCRによって測定され、NGF放出はELISAによって決定されました。 結果と議論：ペルオキシニトライトへの単一の暴露は、反応性の形態学的変化と窒素免疫反応性の増加と一致する星状細胞におけるNGF発現と分泌を特異的に誘導しました。これらの結果は、反応性星状細胞におけるNGF発現が酸化ストレスの制御下にあることを示唆しています。

BACKGROUND: Overproduction of nitric oxide (NO) has been recognized as a major mechanism of neurotoxicity. NO reacts with superoxide to generate peroxynitrite, a strong oxidizing and nitrating species. Peroxynitrite is formed in glial cells and degenerating neurons in neuropathological conditions, including amyotrophic lateral sclerosis (ALS). In ALS, motor neurons re-express the p75 neurotrophin receptor (p75NTR) and might become vulnerable to NGF. In the present study, we investigated whether peroxynitrite stimulated nerve growth factor (NGF) expression in spinal cord astrocytes. MATERIALS AND METHODS: Astrocyte monolayers were exposed to peroxynitrite and nitrotyrosine formation was determined by immunofluorescence. mRNA levels for NGF, brain derived neutrophic factor (BDNF) and fibroblast growth factor-2 (FGF-2) were measured by semi-quantitative RT-PCR and NGF release was determined by ELISA. RESULTS AND DISCUSSION: A single exposure to peroxynitrite specifically induced NGF expression and secretion in astrocytes coincident with reactive morphological changes and increased nitrotyrosine immunoreactivity. These results suggest that NGF expression in reactive astrocytes is under the control of oxidative stress.