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Science in China. Series C, Life sciences2004Aug01Vol.47issue(4)

マイトジェン活性化プロテインキナーゼは、パナックス高麗人参の細胞培養でキトサンによって誘導される酸化バーストとサポニン合成を媒介します

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文献タイプ:
  • Journal Article
  • Research Support, Non-U.S. Gov't
概要
Abstract

キトサン(CHN)は、高麗人参細胞に39 kDおよび42 kDプロテインキナーゼの活性を特に誘導しました。これは、マイトジェン活性化プロテインキナーゼ(MAPK)経路、PD98059の阻害剤によって抑制される可能性があります。in vitroでMAPK抗体またはキナーゼアッセイを使用した免疫沈降(IP)は、CHN誘導42 kDおよび39 kDプロテインキナーゼがMAPKファミリーに属していることも示しました。PD98059は、高麗人参スカレンシンターゼと高麗人参スクワレンエポキシダーゼ遺伝子(GSSおよびGSE)のCHN誘導転写、CHN誘発ベータアミリンシンターゼ(ベータAS)の蓄積、およびサポニンの合成を抑制しました。これらの結果は、MAPKのCHN誘発性活性がCHN誘発サポニン合成に必要であることを示しました。EGTAとLACL3は、CHN誘導39 kDおよび42 kD MAPKアクティビティを抑制しました。Ruthenium Red(RR)は、CHN誘導39 kD活性を抑制する可能性があります。それらはすべて、CHN誘導サポニン合成を抑制しました。これらの結果は、CHN誘発サポニン合成には、サイトゾルカルシウムのCHN誘発性増分が必要であることを示しています。PD98059は、CHN誘導酸化バースト(血漿膜NADPHオキシダーゼの活性の増加とH2O2の産生を含む)を抑制しましたが、ジフェニレンヨードニウム(DPI)、ジメチルチョウリア(DMTU)、および2,5-ジヒドロシンナム酸メチルエスト(DHC)はできませんでした(DHC)CHN誘発MAPKアクティビティを抑制しますMAPKは、おそらくCHN誘導酸化剤の上流で機能している可能性があることを示しました。

キトサン(CHN)は、高麗人参細胞に39 kDおよび42 kDプロテインキナーゼの活性を特に誘導しました。これは、マイトジェン活性化プロテインキナーゼ(MAPK)経路、PD98059の阻害剤によって抑制される可能性があります。in vitroでMAPK抗体またはキナーゼアッセイを使用した免疫沈降(IP)は、CHN誘導42 kDおよび39 kDプロテインキナーゼがMAPKファミリーに属していることも示しました。PD98059は、高麗人参スカレンシンターゼと高麗人参スクワレンエポキシダーゼ遺伝子(GSSおよびGSE)のCHN誘導転写、CHN誘発ベータアミリンシンターゼ(ベータAS)の蓄積、およびサポニンの合成を抑制しました。これらの結果は、MAPKのCHN誘発性活性がCHN誘発サポニン合成に必要であることを示しました。EGTAとLACL3は、CHN誘導39 kDおよび42 kD MAPKアクティビティを抑制しました。Ruthenium Red(RR)は、CHN誘導39 kD活性を抑制する可能性があります。それらはすべて、CHN誘導サポニン合成を抑制しました。これらの結果は、CHN誘発サポニン合成には、サイトゾルカルシウムのCHN誘発性増分が必要であることを示しています。PD98059は、CHN誘導酸化バースト(血漿膜NADPHオキシダーゼの活性の増加とH2O2の産生を含む)を抑制しましたが、ジフェニレンヨードニウム(DPI)、ジメチルチョウリア(DMTU)、および2,5-ジヒドロシンナム酸メチルエスト(DHC)はできませんでした(DHC)CHN誘発MAPKアクティビティを抑制しますMAPKは、おそらくCHN誘導酸化剤の上流で機能している可能性があることを示しました。

Chitosan (CHN) specially induced the activities of 39 kD and 42 kD protein kinases in ginseng cells, which could be suppressed by an inhibitor of mitogen-activated protein kinase (MAPK) pathway, PD98059. The immunoprecipitation (IP) using MAPK antibody or kinase assay in vitro also showed that CHN-induced 42 kD and 39 kD protein kinases belonged to the MAPK family. PD98059 suppressed CHN-induced transcriptions of ginseng squalene synthase and ginseng squalene epoxidase genes (gss and gse), CHN-induced accumulation of beta-Amyrin synthase (beta-AS) and synthesis of saponin. These results showed that CHN-induced activities of MAPKs were necessary for the CHN-induced saponin synthesis. EGTA and LaCl3 suppressed CHN-induced 39 kD and 42 kD MAPK activities. Ruthenium red (RR) could suppress CHN-induced 39 kD activity. All of them suppressed CHN-induced saponin synthesis. These results indicated that CHN-induced increment of cytosolic calcium was necessary for CHN-induced saponin synthesis. PD98059 also suppressed CHN-induced oxidative burst (including the increment of activity of plasma membrane NADPH oxidase and production of H2O2), but diphenylene iodonium (DPI), dimethylthiourea (DMTU) and 2,5-dihydroxycinnamic acid methyl ester (DHC) could not suppress CHN-induced MAPK activities, which indicated that MAPK was possibly function upstream of CHN-induced oxidative burst.

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