マトリックス支援レーザー脱着/イオン化質量分析によるイメージングによる皮膚の医薬品化合物の決定

マトリックス支援レーザー脱着/イオン化（MALDI）四重極飛行時間質量分析（Q-TOFMS）が使用され、皮膚の生体異物性物質の分布を検出およびイメージします。ブタ表皮組織は、ケトコナゾール（+/-）-1-アセチル-4- [[（2r、4s）-2-（2,4-ジクロロフェニル）-2-を含む薬用シャンプーである「ニゾラル」で処理されました。（イミダゾール-1-イルメチル）-1,3-ジオキソラン-4-イル]メトキシ]フェニル]ピペラジン）活性成分として。37度Cで1時間インキュベートした後、すべての過剰な製剤を表面から洗浄しました。次に、薬物処理された組織の断面をセルロース膜にブロットし、マトリックス（アルファシアノ-4-ヒドロキシティク皮酸（CHCA））でエアスプレー堆積により前脱ぎました。別々の実験では、組織表面は三角形の前者の中でニゾラルで処理され、その後マトリックスコーティングされた膜にブロットされました。次に、サンプル膜を、接着テープで特殊なマルディターゲットの凹部に取り付けました。すべてのサンプルは、適用されたバイオシステム「Q-StarパルサーI」ハイブリッドQ-TOF質量分析計を使用して、オラゴンのMaldiイオンソースとイメージングソフトウェアを備えたハイブリッドQ-TOF質量分析計を使用して分析しました。プロトン分子の検出は、この手法によって容易に達成できました。テンプレート内の組織の治療により、薬物の予想される分布を描いた画像が生まれ、この手法が空間的に有用なデータを生成できることを実証しました。皮膚への印加化合物の透過を示すイオン画像は、処理された組織の横断的な刻印を想像することにより達成されました。ケトコナゾールの測定のためのキャリブレーショングラフは、マトリックスイオンのナトリウム付加物を内部標準として使用して調製しました。これにより、皮膚の薬物の定量的プロファイルの構築が可能になりました。インゲン型ヘマトキシリンとエオシン染色および顕微鏡法を使用して、ブタ表皮組織の組織学的画像を得るために使用されました。質量分析および組織学的画像を重ね合わせると、皮膚組織層への薬物浸透が示されるように見えました。

Matrix-assisted laser desorption/ionisation (MALDI) quadrupole time-of-flight mass spectrometry (Q-TOFMS) has been used to detect and image the distribution of a xenobiotic substance in skin. Porcine epidermal tissue was treated with 'Nizoral', a medicated shampoo containing ketoconazole (+/-)-1-acetyl-4-[p-[[(2R,4S)-2-(2,4-dichlorophenyl)-2-(imidazol-1-ylmethyl)-1,3-dioxolan-4-yl]methoxy]phenyl]piperazine) as active ingredient. Following incubation for 1 h at 37 degrees C all excess formulation was washed from the surface. A cross-section of the drug-treated tissue was then blotted onto a cellulose membrane, precoated in matrix (alpha-cyano-4-hydroxycinnamic acid (CHCA)), by airspray deposition. In separate experiments the tissue surface was treated with Nizoral within a triangular former, and subsequently blotted onto a matrix-coated membrane. Sample membranes were then mounted into the recess of specialised MALDI targets with adhesive tape. All samples were analysed by MALDI-TOFMS using an Applied Biosystem 'Q-star Pulsar i' hybrid Q-TOF mass spectrometer fitted with an orthagonal MALDI ion source and imaging software. Detection of the protonated molecule was readily achievable by this technique. Treatment of the tissue within a template gave rise to images depicting the expected distribution of the drug, demonstrating that this technique is capable of producing spatially useful data. Ion images demonstrating the permeation of the applied compound into the skin were achieved by imaging a cross-sectional imprint of treated tissue. A calibration graph for the determination of ketoconazole was prepared using the sodium adduct of the matrix ion as an internal standard. This enabled construction of a quantitative profile of drug in skin. Conventional haematoxylin and eosin staining and microscopy methods were employed to obtain a histological image of the porcine epidermal tissue. Superimposing the mass spectrometric and histological images appeared to indicate drug permeation into the dermal tissue layer.