核膜は、アフリカツメガエルの卵抽出物におけるG1核の複製を防ぎます

同期されたHeLa細胞を使用して、単一の細胞周期の再複雑さを防ぐ際​​の核膜の役割を調査しました。核を無傷の核膜で調製し、ストレプトリシン-Oまたはジギトニンを使用してアッセイし、アセノパスの卵抽出物の複製のためにアッセイしました。無傷のG1核は半順守的に複製しますが、無傷のG2核は卵抽出物では複製されません。ただし、NP-40で処理することによりG2核の核膜を透過すると、細胞周期制御下で卵抽出物ですべて複製することができ、G2とG1ヒト核を区別し、単一の細胞周期内での修正を防ぐために核膜の完全性が必要であることを示唆しています。結果は、以前に提案されたライセンス因子モデルの観点から議論されています。

We have used synchronized HeLa cells to investigate the role of the nuclear membrane in preventing rereplication in a single cell cycle. Nuclei were prepared with intact nuclear membranes using streptolysin-O or digitonin and assayed for replication in Xenopus egg extracts. Intact G1 nuclei replicate semiconservatively, but intact G2 nuclei do not replicate in egg extract. However, permeabilizing the nuclear membranes of G2 nuclei by treatment with NP-40 allows them all to replicate in egg extract under cell cycle control, suggesting that integrity of the nuclear membrane is required to distinguish G2 from G1 human nuclei and to prevent rereplication within a single cell cycle. The results are discussed in terms of the previously proposed licensing factor model.