内毒素血症中の好中球誘発性肝障害に対するCXCケモカインの生成と機能的重要性

好中球化学誘引物CXCケモカインKCおよびマクロファージ炎症性タンパク質-2（MIP-2）が好中球の輸血に関与し、肝臓損傷がガラクトサミン（GAL、700 mg/kg）で処理されたC3HEB/FEJマウスでテストされたという仮説（ET（ET）、100マイクログ/kg）、またはgal + et（gal/et）。肝臓KCおよびMIP-2 mRNAレベルおよび血漿CXCケモカイン濃度は、GAL/ETまたはET単独の1.5時間後に劇的に増加し、徐々に7時間まで減少しました。マウス組換えサイトカイン（TNF-α、IL-1アルファ、およびIL-1ベータ）は、GAL/ETではなく、ET耐性C3H/HEJ株にCXCケモカイン形成を誘導しました。KCおよびMIP-2の機能的重要性を評価するために、C3HEB/FEJマウスをGAL/ETおよびコントロールIgGまたは抗KCと抗MIP-2抗体の組み合わせで処理しました。抗CXCケモカイン抗体は、肝細胞アポトーシス、正弦波好中球隔離および排出、または7時間の肝障害を減衰させませんでした。さらに、GAL/ETで処理したBALB/CJ野生型とCXC受容体2遺伝子ノックアウト（CXCR2 - / - ）マウスの間に肝臓損傷に差はありませんでした。GAL/ETが未処理のCXCR2 - / - 動物の正弦波に位置する好中球の数が増加した後の野生型マウスよりも、CXCR2 - / - の肝臓の好中球数が高い。パンカスパーゼ阻害剤z-val-ala-asp-フルオロメチルケトンは、GAL/ET誘発アポトーシスおよび好中球の排出および損傷を除去しましたが、CXCケモカイン形成は除去されませんでした。したがって、GAL/ETは、肝臓における大規模なサイトカイン依存性CXCケモカイン形成を誘導しました。しかし、好中球の血管外侵害と損傷は、6〜7時間のアポトーシス細胞損傷に応じて発生し、CXCケモカイン形成とは無関係でした。

The hypothesis that the neutrophil chemoattractant CXC chemokines KC and macrophage inflammatory protein-2 (MIP-2) are involved in neutrophil transmigration and liver injury was tested in C3Heb/FeJ mice treated with galactosamine (Gal, 700 mg/kg), endotoxin (ET, 100 microg/kg), or Gal + ET (Gal/ET). Hepatic KC and MIP-2 mRNA levels and plasma CXC chemokine concentrations were dramatically increased 1.5 h after Gal/ET or ET alone and gradually declined up to 7 h. Murine recombinant cytokines (TNF-alpha, IL-1 alpha, and IL-1 beta), but not Gal/ET, induced CXC chemokine formation in the ET-resistant C3H/HeJ strain. To assess the functional importance of KC and MIP-2, C3Heb/FeJ mice were treated with Gal/ET and control IgG or a combination of anti-KC and anti-MIP-2 antibodies. Anti-CXC chemokine antibodies did not attenuate hepatocellular apoptosis, sinusoidal neutrophil sequestration and extravasation, or liver injury at 7 h. Furthermore, there was no difference in liver injury between BALB/cJ wild-type and CXC receptor-2 gene knockout (CXCR2-/-) mice treated with Gal/ET. The higher neutrophil count in livers of CXCR2-/- than in wild-type mice after Gal/ET was caused by the elevated number of neutrophils located in sinusoids of untreated CXCR2-/- animals. The pancaspase inhibitor Z-Val-Ala-Asp-fluoromethylketone eliminated Gal/ET-induced apoptosis and neutrophil extravasation and injury but not CXC chemokine formation. Thus Gal/ET induced massive, cytokine-dependent CXC chemokine formation in the liver. However, neutrophil extravasation and injury occurred in response to apoptotic cell injury at 6-7 h and was independent of CXC chemokine formation.