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Analytical biochemistry2005Jan15Vol.336issue(2)

GELランニングバッファー内のSDSの有無にかかわらず、アビジン機能親和性電気泳動によるSDS処理ビオチン化タンパク質とペプチドの捕獲

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文献タイプ:
  • Journal Article
  • Research Support, Non-U.S. Gov't
概要
Abstract

アビジン機能親和性電気泳動(AFAEP)は、アフィニティ電気泳動の新しい方法です。この手法では、アミノ/アミド基との相互作用により、ゲルマトリックス内にアビジンを埋め込むポリアクリルアミドゲル溶液に二機能性リンカーグルタルアルデヒドを加えます。サンプルは、トリグリシンドデシル硫酸ナトリウム(SDS)サンプルバッファーで加熱され、ビオチン化タンパク質ビオチン化ペプチドが負に帯電し、PI値に関係なくアビジンゾーンを介してカソードに向かって電気泳動を移動します。AFAEP法により、サンプルバッファーとゲル実行バッファーの両方でSDSの使用に関係なく、ビオチン化タンパク質またはビオチン化ペプチドの捕獲と濃度が可能になります。

アビジン機能親和性電気泳動(AFAEP)は、アフィニティ電気泳動の新しい方法です。この手法では、アミノ/アミド基との相互作用により、ゲルマトリックス内にアビジンを埋め込むポリアクリルアミドゲル溶液に二機能性リンカーグルタルアルデヒドを加えます。サンプルは、トリグリシンドデシル硫酸ナトリウム(SDS)サンプルバッファーで加熱され、ビオチン化タンパク質ビオチン化ペプチドが負に帯電し、PI値に関係なくアビジンゾーンを介してカソードに向かって電気泳動を移動します。AFAEP法により、サンプルバッファーとゲル実行バッファーの両方でSDSの使用に関係なく、ビオチン化タンパク質またはビオチン化ペプチドの捕獲と濃度が可能になります。

Avidin functional affinity electrophoresis (AFAEP) is a new method of affinity electrophoresis. In this technique, bifunctional linker glutaraldehyde is added to the polyacrylamide gel solution to embed avidin within the gel matrix by interaction with the amino/amide groups. Samples are heated with triglycine sodium dodecyl sulfate (SDS) sample buffer to ensure that biotinylated proteins biotinylated peptides are negatively charged and migrate electrophoretically toward the cathode through the avidin zone regardless of their pI values. The AFAEP method allows the capture and concentration of biotinylated proteins or biotinylated peptides irrespective of the use of SDS in both the sample buffer and the gel running buffer.

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