インターフェロンシグナル伝達に依存しない経路によるIRF7プロモーターの転写活性の調節

インターフェロン（IFN）刺激応答要素（ISRE）を含む遺伝子は、IFNおよびウイルス感染による誘導性に応じて2つのグループに分割できます。1つはIFNによってのみ誘導され、もう1つはIFNおよびウイルス感染の両方によって誘導されます。IFN調節因子7（IRF7）がI型IFNの誘導に不可欠な多機能遺伝子であることは現在明らかですが、IRF7プロモーター（IRF7P）の調節はあまり理解されていません。IRF7遺伝子には、2つのIFN応答要素、プロモーター領域のIRF結合要素（IRFE）と最初のイントロンのISREが含まれ、IFN刺激遺伝子因子の結合によりIFNトリガーJAK-STAT経路によって誘導されます。3（ISGF3）ISREへの複合体。この研究では、コアクチベーターCREB結合タンパク質とp300を使用して、sendaiウイルス感染時にウイルス活性化因子（VAF）複合体を形成し、IRF7 ISREおよびIRFEに結合し、IRF7転写を直接活性化できるIRF3とIRF7が示すことを示しています。プロモーターレポーターアッセイは、ISREとIRFEの両方がIRF7とIRF3による活性化に反応することを示しています。IRF7または/およびIRF3を一時的に発現する細胞では、VAFレベルとVAFの結合は、Sendaiウイルス感染後に明らかに増加します。JAK1キナーゼ死んだドミナントネガティブコンストラクトを安定してトランスフェクトしたJAK1キナーゼの不活性293細胞、および変異細胞株SAN（IFNalpha-/beta-）、U2A（IRF9-）、U4A（JAK1-）、およびDKO（IRF1（IRF1） - /IRF2-）VAFによって直接活性化されたIRF7転写がIFNシグナル伝達経路とは異なり、独立していることを示しています。したがって、IRF7転写は、IRF7を含むVAFを独自のISREおよびIRFEに結合することにより自己調節されます。結果は、IRF7プロモーターの活性化、IFNおよびウイルス感染による2つの異なるメカニズムを示しています。タイプI IFNSとIRF7の間の規制ネットワークが提案されています。異なる経路は、ウイルス感染のさまざまな段階での効率的な抗ウイルス反応の特別な役割を反映している可能性があります。

Genes containing an interferon (IFN)-stimulated response element (ISRE) can be divided into two groups according to their inducibility by IFN and virus infection: one induced only by IFN and the other induced by both IFN and virus infection. Although it is now clear that IFN regulatory factor 7 (IRF7) is a multifunctional gene essential for induction of type I IFNs, regulation of the IRF7 promoter (IRF7p) is poorly understood. The IRF7 gene includes two IFN responsive elements, an IRF-binding element (IRFE) in the promoter region and an ISRE in the first intron, and is induced by the IFN-triggered Jak-STAT pathway by binding of the IFN-stimulated gene factor 3 (ISGF3) complex to the ISRE. In this study, we demonstrate that IRF3 and IRF7, which with the coactivators CREB-binding protein and P300 form the virus-activated factor (VAF) complex upon Sendai virus infection, bind to the IRF7 ISRE and IRFE and can directly activate IRF7 transcription. Promoter reporter assays show that both the ISRE and IRFE are responsive to activation by IRF7 and IRF3. In cells transiently expressing IRF7 or/and IRF3, the VAF level and binding of VAF are clearly increased after Sendai virus infection. Studies with Jak1 kinase inactive 293 cells that were stably transfected with a Jak1 kinase dead dominant negative construct, and the mutant cell lines SAN (IFNalpha-/beta-), U2A (IRF9-), U4A (Jak1-), and DKO (IRF1-/IRF2-) show that the IRF7 transcription activated directly by VAF is distinct from and independent of the IFN signaling pathway. Thus, IRF7 transcription is autoregulated by binding of the IRF7-containing VAF to its own ISRE and IRFE. The results show two distinct mechanisms for the activation of the IRF7 promoter, by IFN and by virus infection. A regulatory network between type I IFNs and IRF7 is proposed. The distinct pathways may reflect special roles for an efficient antiviral response at different stages of virus infection.