GPR56は、神経膠腫で過剰発現し、腫瘍細胞の接着で機能するGPCRです

GPR56（TM7XN1とも呼ばれる）は、神経前駆細胞の発達に役割を果たし、ヒト脳の発達奇形に関連しているセクレチンファミリーの新たに発見された孤児Gタンパク質共役受容体（GPCR）です。GPR56は、非常に大きなN末端細胞外領域（381アミノ酸）を持ち、GPCRタンパク質分解部位を定義する4つのシステイン残基で構成されるこの新しいサブクラスの中に新しい特徴を含んでいるという点で、他のセクレチン様家族のメンバーと分岐します。）最初の膜貫通ドメインの直前に位置します。アミノ末端ドメインの残りの部分には、ムチン様タンパク質と同様の多数の可能なNおよびO結合グリコシル化部位が含まれています。これらの機能は、細胞細胞、または細胞マトリックスの相互作用における役割を示唆しています。ここでは、機能的ゲノミクスを使用して多形性膠芽腫におけるGPR56のアップレギュレーションを示します。免疫組織化学の研究により、正常な成人脳組織では検出不能な発現レベルの膠芽腫/星状細胞腫腫瘍サンプルの大多数のGPR56タンパク質の発現が確認されました。抗GPR56抗体を使用したヒト神経膠腫細胞の免疫蛍光分析は、GPR56が膜糸状仮足の最先端で発現し、α-アクチニンと共局在することを示しています。精製された組換えGPR56細胞外ドメインタンパク質は、神経膠腫細胞の接着を阻害し、異常な細胞骨格形態と細胞の丸めを引き起こします。これらの結果は、細胞外ドメインが正体不明のリガンドと競合し、細胞付着におけるGPR56の正常な機能をブロックする可能性があることを示しています。レポーターアッセイでは、GPR56の過剰発現は、NF-Kappab、PAI-1、およびTCF転写応答要素を活性化します。これらの経路は、細胞骨格シグナル伝達、接着、腫瘍生物学に関係しています。上記の結果は、GPR56が接着GPCRとして機能し、接着シグナル伝達に関与していることを示しています。

GPR56 (also known as TM7XN1) is a newly discovered orphan G-protein-coupled receptor (GPCR) of the secretin family that has a role in the development of neural progenitor cells and has been linked to developmental malformations of the human brain. GPR56 diverges from other secretin-like family members in that it has an extremely large N-terminal extracellular region (381 amino acids) and contains a novel feature among this new subclass, consisting of four cysteine residues that define a GPCR proteolytic site (GPS motif) located just before the first transmembrane spanning domain. The rest of the amino-terminal domain contains a large number of possible N- and O-linked glycosylation sites similar to mucin-like proteins. These features suggest a role in cell-cell, or cell-matrix interactions. Here, we demonstrate upregulation of GPR56 in glioblastoma multiforme tumors using functional genomics. Immunohistochemistry studies confirmed the expression of GPR56 protein in a majority of glioblastoma/astrocytoma tumor samples with undetectable levels of expression in normal adult brain tissue. Immunofluorescence analysis of human glioma cells using anti-GPR56 antibodies demonstrate that GPR56 is expressed on the leading edge of membrane filopodia and colocalizes with alpha-actinin. Purified recombinant GPR56 extracellular domain protein inhibits glioma cell adhesion and causes abnormal cytoskeletal morphology and cell rounding. These results indicate that the extracellular domain may compete for unidentified ligand(s), and block the normal function of GPR56 in cell attachment. In reporter assays, overexpression of GPR56 activates the NF-kappaB, PAI-1 and TCF transcriptional response elements. These pathways have been implicated in cytoskeletal signaling, adhesion and tumor biology. The above results indicate that GPR56 serves as an adhesion GPCR and is involved in adhesion signaling.