TNF-alphaは、ヒト冠動脈内皮細胞におけるソマトスタチン、ソマトスタチン受容体、およびコルチスタチンの発現を減少させます

背景：この研究の目的は、ヒト内皮細胞におけるSSTに応答したTNF-alphaによるソマトスタチン（SST）とその受容体（SSTR）の発現とその調節を決定することでした。 材料と方法：ヒト冠動脈内皮細胞（HCAEC）を、TNF-alpha（0.1、1、または10 ng/ml）なしで24時間培養しました。SST、SSTR-1-5のmRNAレベル、およびハウスキーピング遺伝子（ベータアクチン）は、リアルタイムRT-PCRによって決定されました。SSTR-2の発現は、免疫蛍光染色によっても実証されました。SST治療に応答した細胞増殖（0.04、0.2、または1 ng/ml）は、[3H]チミジンの取り込みによって実施されました。 結果：TNF-alpha治療なしでは、HCAECはSST、SSTR-1、SSTR-2、およびSSTR-5のmRNA発現を示しました。SSTR-2のmRNAは、SSTR-1およびSSTR-5のmRNAよりも高いレベルで発現しました。ただし、SSTR-3およびSSTR-4は発現していないか、最小限に発現していませんでした。TNF-alphaでの治療後、SST、SSTR-1、SSTR-2、およびSSTR-5のmRNAレベルは、用量依存的に有意に減少しました。TNF-alpha（1 ng/mL）は、コントロールと比較して、SST、SSTR-1、SSTR-2、およびSSTR-5 x 93、51、85、および99％をそれぞれ減少させました（P <0.001、Tテスト）。SSTR-2の免疫反応性も、TNF-α治療後に減少しました。SST処理細胞は、用量依存的に[3H]チミジンの取り込みの有意な減少を示しました。TNF-alpha治療は、細胞増殖におけるSST阻害能力を低下させました。 結論：HCAECSはSST、SSTR-1、SSTR-2、およびSSTR-5を発現します。これらはすべてTNF-alpha治療によって減少します。さらに、外因性SSTによる治療は細胞の増殖を大幅に減少させ、この阻害効果もTNF-alphaによって減少します。

BACKGROUND: The objective of this study was to determine the expression of somatostatin (SST) and its receptors (SSTRs) and their regulation by TNF-alpha as well as cell proliferation in response to SST in human endothelial cells. MATERIALS AND METHODS: Human coronary artery endothelial cells (HCAECs) were cultured without or with TNF-alpha (0.1, 1, or 10 ng/ml) for 24 h. The mRNA levels of SST, SSTR-1-5, as well as a housekeeping gene (beta-actin) were determined by real-time RT-PCR. Expression of SSTR-2 was also demonstrated by immunofluorescence staining. Cell proliferation in response to SST treatment (0.04, 0.2, or 1 ng/ml) was performed by [3H]thymidine incorporation. RESULTS: Without TNF-alpha treatment, HCAECs showed mRNA expression of SST, SSTR-1, SSTR-2, and SSTR-5. The mRNA of SSTR-2 was expressed at a higher level than that of SSTR-1 and SSTR-5. However, SSTR-3 and SSTR-4 were not expressed or were minimally expressed. After treatment with TNF-alpha, the mRNA levels of SST, SSTR-1, SSTR-2, and SSTR-5 were significantly reduced in a dose-dependent fashion. TNF-alpha (1 ng/ml) reduced SST, SSTR-1, SSTR-2, and SSTR-5 by 93, 51, 85, and 99%, respectively, compared to controls (P < 0.001, t test). The immunoreactivity of SSTR-2 was also reduced after TNF-alpha treatment. SST-treated cells showed a significant reduction in [3H]thymidine incorporation in a dose-dependent manner. TNF-alpha treatment decreased SST inhibitory potential in cell proliferation. CONCLUSIONS: HCAECs express SST, SSTR-1, SSTR-2, and SSTR-5, which are all decreased by TNF-alpha treatment. Furthermore, treatment with exogenous SST significantly reduces cell proliferation, and this inhibitory effect is also decreased by TNF-alpha.