ヒト免疫グロブリンA1（IgA1）の変異の効果は、多様な細菌IgA1プロテアーゼによる切断に対するその感受性に対するヒンジの影響

ヒト免疫グロブリンA1（IgA1）の成分は、細菌のIgA1プロテアーゼによる切断に対する感受性を支配するヒンジを調査しました。異なるヒンジ変異を伴う組換え抗体は、ヒトIgA1ヒンジ領域の半分を持つヒトIgA2で構成されるハイブリッドから構築されました。このハイブリッド抗体とそれに由来するすべての変異体抗体は、Streptococcus OralisおよびStreptococcus MISITH 1株からのIgA1プロテアーゼによる切断に耐性がありましたが、Streptococcus Pneumoniae、Streptococcus strainsの一部によってさまざまな程度に切断されました。2 Iga1インフルエンザ、Neisseria Meningitidis、およびNeisseria gonorrhoeaeの2つのプロテアーゼ。驚くべきことに、野生型IgA1ヒンジでプロセルペプチド結合を切断するプロテアーゼは、ヒンジのプロセルペプチド結合を欠く変異体抗体を切断することができました。Iga1ヒンジ型は、ヒンジにプロスルーペプチド結合を欠いている変異抗体を切断することができました。したがって、酵素は、そのような結合が利用できない場合、好ましいポストプロリンペプチド結合の代替品を切断できます。代表的な抗体消化産物のペプチド配列分析により、この結論が確認されました。ヒンジのCH2端近くの切断可能なペプチド結合の存在は、硬化性結合がヒンジのCH1端にある場合よりも大きな切断をもたらすように見えました。潜在的に切断可能なプロセルおよびプロスルーペプチド結合を含むヒンジの残基230でのプロリンからセリンへの置換は、多くのIgA1プロテアーゼによる切断に対する抗体の耐性を増加させました。

Components of the human immunoglobulin A1 (IgA1) hinge governing sensitivity to cleavage by bacterial IgA1 proteases were investigated. Recombinant antibodies with distinct hinge mutations were constructed from a hybrid comprised of human IgA2 bearing half of the human IgA1 hinge region. This hybrid antibody and all the mutant antibodies derived from it were resistant to cleavage by the IgA1 proteases from Streptococcus oralis and Streptococcus mitis biovar 1 strains but were cleaved to various degrees by those of Streptococcus pneumoniae, some Streptococcus sanguis strains, and the type 1 and 2 IgA1 proteases of Haemophilus influenzae, Neisseria meningitidis, and Neisseria gonorrhoeae. Remarkably, those proteases that cleave a Pro-Ser peptide bond in the wild-type IgA1 hinge were able to cleave mutant antibodies lacking a Pro-Ser peptide bond in the hinge, and those that cleave a Pro-Thr peptide bond in the wild-type IgA1 hinge were able to cleave mutant antibodies devoid of a Pro-Thr peptide bond in the hinge. Thus, the enzymes can cleave alternatives to their preferred postproline peptide bond when such a bond is unavailable. Peptide sequence analysis of a representative antibody digestion product confirmed this conclusion. The presence of a cleavable peptide bond near the CH2 end of the hinge appeared to result in greater cleavage than if the scissile bond was at the CH1 end of the hinge. Proline-to-serine substitution at residue 230 in a hinge containing potentially cleavable Pro-Ser and Pro-Thr peptide bonds increased the resistance of the antibody to cleavage by many IgA1 proteases.