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Journal of neuroscience methods1992Jan01Vol.41issue(1)

蛍光検出を使用したアセチルコリン、コリン、およびそれらの類似体のHPLC測定のための敏感な方法

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文献タイプ:
  • Journal Article
  • Research Support, Non-U.S. Gov't
概要
Abstract

アセチルコリンとコリンの逆相HPLC分離および組織抽出物または灌流液のホモログの逆相HPLC分離と、ポストコラムの酵素誘導体化および蛍光定量化と組み合わせて説明されています。分離は、疎水性部分で誘導されたポリマー樹脂で発生し、移動相はNa2HPO4、3-(p-ヒドロキシフェニル)プロピオン酸とドデシル硫酸ナトリウムで構成されています。郵便局所酵素反応器には、固定されたアセチルコリンエステラーゼ、コリンオキシダーゼ、ペルオキシダーゼが含まれています。検出限界は、サンプルごとに1 pmolコリンと3 pmolアセチルコリンです。この方法には、電気化学検出で遭遇する干渉がなく、無人の自動操作に適しています。

アセチルコリンとコリンの逆相HPLC分離および組織抽出物または灌流液のホモログの逆相HPLC分離と、ポストコラムの酵素誘導体化および蛍光定量化と組み合わせて説明されています。分離は、疎水性部分で誘導されたポリマー樹脂で発生し、移動相はNa2HPO4、3-(p-ヒドロキシフェニル)プロピオン酸とドデシル硫酸ナトリウムで構成されています。郵便局所酵素反応器には、固定されたアセチルコリンエステラーゼ、コリンオキシダーゼ、ペルオキシダーゼが含まれています。検出限界は、サンプルごとに1 pmolコリンと3 pmolアセチルコリンです。この方法には、電気化学検出で遭遇する干渉がなく、無人の自動操作に適しています。

A method is described for reversed-phase HPLC separation of acetylcholine and choline and of their homologues in tissue extracts or perfusion fluids, combined with postcolumn enzymatic derivatization and fluorometric quantification. The separation occurs on a polymeric resin derivatized with hydrophobic moiety and the mobile phase consists of Na2HPO4, 3-(p-hydroxyphenyl)propionic acid and sodium dodecylsulphate; postcolumn enzyme reactor contains immobilized acetylcholinesterase, choline oxidase, and peroxidase. The limits of detection are 1 pmol choline and 3 pmol acetylcholine per sample. The method is free of interferences encountered with electrochemical detection and well suited for non-attended automatic operation.

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