微小管破壊は、マスト細胞脱顆粒経路におけるカルシウム流入の阻害を通じてアレルギー反応を抑制します

マスト細胞は、炎症性メディエーターを含む顆粒を放出する分泌細胞です。いくつかの最近のデータは、このプロセスでサイトスケレトンが役割を果たすことを示唆しています。ただし、Ca2+シグナル伝達における微小管の役割はまだ十分に定義されていません。この研究では、微小管脱骨化経路で微小管脱減少剤ノコダゾールとコルヒチンを使用して、微小管細胞骨格がマスト細胞の脱顆粒経路でCa2+流入を維持するために重要であることを実証します。微小管の除去剤は、RBL-2H3細胞および骨髄由来のマスト細胞におけるAg誘発脱顆粒を阻害しました。細胞を微小管の脱分解剤の存在下でAGで刺激した場合、小胞体（ER）からのCa2+の放出に影響を与えることなく、Ca2+流入が減少しました。Ca（2+） - ER膜、タプシガルギンおよびシクロピアゾン酸のATPaseの阻害剤によって誘導された容量性Ca2+侵入も、ノコダゾールによって減少しました。蛍光プローブ分析により、ノコダゾールは微小管の形成を破壊し、ERの細胞質分布を変化させることが実証されました。微小管の除去剤は、Sprague Dawleyラットの逆皮膚における受動的な皮膚アナフィラキシー反応を減衰させました。これらの結果は、マスト細胞の微小管細胞骨格が、脱顆粒とアレルギー反応の原因となるAg誘導性容量Ca2+侵入を維持するために重要であることを示唆しています。

Mast cells are secretory cells that release their granules, which contain inflammatory mediators. Some recent data suggested that cytoskeletons play a role in this process. However, the role of microtubules in Ca2+ signaling has not yet been well defined. In this study, we demonstrate that the microtubule cytoskeleton is important to maintain Ca2+ influx in the degranulation pathway of mast cells, using the microtubule depolymerizers nocodazole and colchicine. The microtubule depolymerizers inhibited Ag-induced degranulation in RBL-2H3 cells and bone marrow-derived mast cells. When the cells were stimulated with Ag in the presence of the microtubule depolymerizers, the Ca2+ influx was decreased without affecting Ca2+ release from the endoplasmic reticulum (ER). Capacitative Ca2+ entry, which was induced by inhibitors of Ca(2+)-ATPase in the ER membrane, thapsigargin and cyclopiazonic acid, was also decreased by nocodazole. Fluorescent probe analysis demonstrated that nocodazole disrupted microtubule formation and changed the cytoplasmic distribution of the ER. The microtubule depolymerizers attenuated the passive cutaneous anaphylaxis reaction in back skin of Sprague Dawley rats. These results suggest that the microtubule cytoskeleton in mast cells is important to maintain Ag-induced capacitative Ca2+ entry, which is responsible for degranulation and the allergic response.