GTP結合タンパク質OBGホモログOBGEは、リボソームの成熟に関与しています

OBGタンパク質は、細菌からヒトまで高度に保存されているGTP結合タンパク質のサブファミリーに属します。OBGE遺伝子の変異は、さまざまな種の多面欠陥を引き起こしますが、機能は不明のままでした。ここでは、大腸菌のOBGホモログであるOBGEの機能を調べます。成長率は、細胞内のOBGEの量と相関しています。協調実験はさらに、OBGEが30Sおよび50Sのリボソームサブユニットに結合するが、70年代のリボソームには結合しないことを示唆しています。プルダウンアッセイは、OBGEが30Sおよび50Sサブユニットのいくつかの特定のリボソームタンパク質、およびRNAヘリカーゼCSDAと関連することを示唆しています。GTPの存在下で、in vitroで16Sおよび23SのリボソームRNAを伴う精製された肥満症状。最後に、OBGEの変異は、プレ-16SR-RNAプロセシング、リボソームタンパク質レベル、およびリボソームタンパク質修飾に影響を及ぼし、それにより70Sリボソームレベルを大幅に低下させます。この証拠は、おそらくrRNA/リボソームタンパク質折りたたみ式シャペロンまたは足場タンパク質として、RRNAおよび/またはrRNA-リボソームタンパク質複合体への結合を通じて、リボソーム生合成においてOBGE機能が機能することを暗示しています。

Obg proteins belong to a subfamily of GTP binding proteins, which are highly conserved from bacteria to human. Mutations of obgE genes cause pleiotropic defects in various species but the function remained unclear. Here we examine the function of ObgE, the Obg homolog in Escherichia coli. The growth rate correlates with the amount of ObgE in cells. Co-fractionation experiments further suggest that ObgE binds to 30S and 50S ribosomal subunits, but not to 70S ribosome. Pull-down assays suggest that ObgE associates with several specific ribosomal proteins of 30S and 50S subunits, as well as RNA helicase CsdA. Purified ObgE cosediments with 16S and 23S ribosomal RNAs in vitro in the presence of GTP. Finally, mutation of ObgE affects pre-16Sr-RNA processing, ribosomal protein levels, and ribosomal protein modification, thereby significantly reducing 70S ribosome levels. This evidence implicates that ObgE functions in ribosomal biogenesis, presumably through the binding to rRNAs and/or rRNA-ribosomal protein complexes, perhaps as an rRNA/ribosomal protein folding chaperone or scaffold protein.