[pH値と時間の影響下での抗原回収免疫組織化学]

目的：P504、P63、CD10、およびKI-67の免疫組織化学染色のための最適な抗原回収バッファーと検索時間を見つける。 方法：次の組織は、10％のホルマリンで固定されていました。前立腺癌、良性前立腺過形成、増殖性乳房疾患、およびヒト乳頭腫ウイルスに感染したカン上皮組織の組織です。これらの組織の免疫組織化学的汚染は、Envisionの方法によって処理されました。最初の抗体は、前立腺癌のP504、良性前立腺過形成の場合はP63、増殖性乳房疾患のCD10、ヒト乳頭腫ウイルスに感染したCunNus上皮組織のKI-67でした。すべての組織に同じ2番目の抗体想像が使用されました。各組織に、3つの異なる抗原回収バッファー、CA（pH 6.0）、EDTA（pH 8.0）およびEDTA-Tris（pH 9.0）を使用しました。各バッファーについて、抗原回復のための4つの期間、すなわち12、20、25、30分がありました。異なる条件での正の信号が観察され、光学顕微鏡下で比較されました。 結果：EDTA-TRISバッファー（pH 9.0）で20分間、30分間P63、Ki-67でEDTA-TRISバッファー（pH 9.0）で検索した後、P504Sの最良の信号が観察されました。CD10の最良の陽性シグナルは、20または25分間の異なるpH値を持つすべてのバッファーで検索後に観察されました。 結論：異なる抗原には、独自の最適な検索バッファーと最適な検索時間があります。比較的、KI-67、P504S、およびP63の抗原回復では、pH 9.0のEDTA-TRISバッファーは、他の低pH回収バッファーよりも優れています。

OBJECTIVE: To find the best antigen retrieval buffer and retrieval time for the immunohistochemical staining of P504S, P63, CD10, and Ki-67. METHODS: The following tissues were fixed in 10% formalin: the tissues of prostate carcinoma, benign prostate hyperplasia, proliferative breast disease and cunnus epithelial tissue infected by human papilloma virus. Immunohistochemical stainings for these tissues were processed by EnVision's methods. The first antibodies were P504S for prostate carcinoma, P63 for benign prostate hyperplasia, CD10 for proliferative breast disease, and Ki-67 for cunnus epithelial tissue infected by human papilloma virus. The same second antibody EnVision was used for all the tissues. For each tissue, we used three different antigen retrieval buffers, CA (pH 6.0), EDTA (pH 8.0) and EDTA-Tris (pH 9.0). For each buffer, there were 4 durations for antigen retrieving, namely 12, 20, 25 and 30 min. The positive signals in different conditions were observed and compared under light microscope. RESULTS: The best signal for P504S was observed after retrieval in the EDTA-Tris buffer (pH 9.0) for 20 min, P63 for 30 min, and Ki-67 for 25 min. The best positive signal for CD10 was observed after retrieval in all the buffers with different pH value for 20 or 25 min. CONCLUSION: Different antigens have their own optimal retrieval buffers and the optimal retrieval time. Relatively, for the antigen retrieval of Ki-67, P504S and P63, EDTA-Tris buffers with pH 9.0 is better than other low pH retrieval buffers.