セマフォリン3aは、神経細胞の表面に点状分布を示し、細胞外マトリックスのプロテオグリカンと相互作用します

分泌されたセマフォリンは、神経発達に不可欠であり、成人ニューロンの亜集団で発現し続け、まだ未知の機能を維持しています。機能的なMYCおよびGFPタグ付きSEMA3Aタンパク質を使用して、神経細胞におけるSEMA3Aの局在に関する洞察を得ました。SEMA3Aは、皮質ニューロンの軸索と樹状突起の両方に局在しています。GFP-SEMA3Aは、神経-2A細胞の表面に特徴的な点状分布を示し、培養細胞の移動経路に局在し、その受容体成分ニューロピリン-1の継続的に誘導されたクラスタリングと共局在し、誘導されました。過剰なグリコサミノグリカンおよびコンドロイチナーゼABCによる治療により、細胞表面SEMA3Aが除去されました。ヘパリンは、Neuropilin-1発現細胞へのSEMA3Aの結合を増強し、その成長円錐崩壊活性を増強しました。一緒に、これらの結果は、神経細胞の細胞外マトリックスにおけるプロテオグリカンとの関連が、化学乳管ガイダンスキューSEMA3Aの局在化に重要な役割を果たし、この相互作用がその生物学的活性を高める可能性があることを示しています。

Secreted semaphorins are essential for neural development and continue to be expressed in subpopulations of adult neurons, where they subserve as yet unknown functions. We employed functional myc- and GFP-tagged Sema3A proteins to obtain insight in the localization of Sema3A in neuronal cells. Sema3A localized to both axons and dendrites of cortical neurons. GFP-Sema3A exhibited a characteristic punctate distribution on the surface of Neuro-2a cells, localized to migratory pathways of cultured cells, and co-localized with and induced clustering of its receptor component neuropilin-1. Treatment with excess glycosaminoglycans and chondroitinase ABC resulted in the removal of cell surface Sema3A. Heparin enhanced Sema3A's binding to neuropilin-1-expressing cells and potentiated its growth cone collapsing activity. Together, these results indicate that association with proteoglycans in the extracellular matrix of neuronal cells plays an important role in the localization of the chemorepulsive guidance cue Sema3A, and that this interaction may enhance its biological activity.