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Experimental cell research2005May15Vol.306issue(1)

ヒト GARP (ゴルジ体関連逆行性タンパク質) 複合体のキャラクタリゼーション

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文献タイプ:
  • Journal Article
概要
Abstract

ゴルジに関連する逆行性タンパク質複合体(GARP)またはVPS 53(VFT)複合体は、細胞間輸送輸送システムの一部です。ここでは、VFTテザリング因子複合体の同定と哺乳類細胞におけるその相互作用を報告します。細胞内分別は、ヒトVPSタンパク質が滑らかな膜/ゴルジ体画分に見られるが、サイトゾルではないことを示しています。ヒトVPSタンパク質の免疫染色は、核周囲の封筒に最も濃縮された小胞分布を示します。エンドソームマーカーとの共染色実験は、これらの小胞のエンドソーム起源を意味します。VFT複合陽性エンドソームの有意な蓄積は、トランスゴルジネットワークエリアの近くにあります。これは、ゴルジ関連の輸送プロセスにおける推定上の役割と一致しています。Saccharomyces cerevisiaeでは、GARPは小さなGTPase YPT6Pの主要エフェクターであり、SNARE TLG1Pと相互作用して膜融合を促進します。したがって、YPT6PのヒトホモログであるRab6は、特にHVPS52に結合します。ヒト細胞では、「孤児」スネアシントキシン10は、HVPS52によって媒介されるGARPの本物の結合パートナーです。これは、ゴルジュでの膜ドッキングおよび融合イベントにおけるヒトシンタキシン10の以前は未知の機能を明らかにしています。まとめると、GARPはさまざまな種の間に大きな保存を示していますが、多様化と専門化はヒト細胞に重要な違いをもたらします。

ゴルジに関連する逆行性タンパク質複合体(GARP)またはVPS 53(VFT)複合体は、細胞間輸送輸送システムの一部です。ここでは、VFTテザリング因子複合体の同定と哺乳類細胞におけるその相互作用を報告します。細胞内分別は、ヒトVPSタンパク質が滑らかな膜/ゴルジ体画分に見られるが、サイトゾルではないことを示しています。ヒトVPSタンパク質の免疫染色は、核周囲の封筒に最も濃縮された小胞分布を示します。エンドソームマーカーとの共染色実験は、これらの小胞のエンドソーム起源を意味します。VFT複合陽性エンドソームの有意な蓄積は、トランスゴルジネットワークエリアの近くにあります。これは、ゴルジ関連の輸送プロセスにおける推定上の役割と一致しています。Saccharomyces cerevisiaeでは、GARPは小さなGTPase YPT6Pの主要エフェクターであり、SNARE TLG1Pと相互作用して膜融合を促進します。したがって、YPT6PのヒトホモログであるRab6は、特にHVPS52に結合します。ヒト細胞では、「孤児」スネアシントキシン10は、HVPS52によって媒介されるGARPの本物の結合パートナーです。これは、ゴルジュでの膜ドッキングおよび融合イベントにおけるヒトシンタキシン10の以前は未知の機能を明らかにしています。まとめると、GARPはさまざまな種の間に大きな保存を示していますが、多様化と専門化はヒト細胞に重要な違いをもたらします。

The Golgi associated retrograde protein complex (GARP) or Vps fifty-three (VFT) complex is part of cellular inter-compartmental transport systems. Here we report the identification of the VFT tethering factor complex and its interactions in mammalian cells. Subcellular fractionation shows that human Vps proteins are found in the smooth membrane/Golgi fraction but not in the cytosol. Immunostaining of human Vps proteins displays a vesicular distribution most concentrated at the perinuclear envelope. Co-staining experiments with endosomal markers imply an endosomal origin of these vesicles. Significant accumulation of VFT complex positive endosomes is found in the vicinity of the Trans Golgi Network area. This is in accordance with a putative role in Golgi associated transport processes. In Saccharomyces cerevisiae, GARP is the main effector of the small GTPase Ypt6p and interacts with the SNARE Tlg1p to facilitate membrane fusion. Accordingly, the human homologue of Ypt6p, Rab6, specifically binds hVps52. In human cells, the "orphan" SNARE Syntaxin 10 is the genuine binding partner of GARP mediated by hVps52. This reveals a previously unknown function of human Syntaxin 10 in membrane docking and fusion events at the Golgi. Taken together, GARP shows significant conservation between various species but diversification and specialization result in important differences in human cells.

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