[原核生物T7プロモーターとそのRNAポリメラーゼによる真核細胞における標的遺伝子の発現]

真核細胞における標的遺伝子の発現効率を高めるために、最も強力な原核発現システムの 1 つである T7 RNA ポリメラーゼと T7 プロモーターが真核細胞に導入されました。T7 バクテリオファージ成分のデュエルプラスミド遺伝子発現システムが開発されました。1 つは真核生物プロモーター CMV の制御下にある T7 ファージ RNA ポリメラーゼ遺伝子を含み (pCMV-T7pol)、もう 1 つは T7 プロモーターと T7 ターミネーターおよび EMCV IRES を含む (pT7IRES) です。真核生物発現のためのこのプラスミド系の実現可能性を試験するために、B型肝炎ウイルスエンベロープHBV preS2/Sを使用してpT7IRES-HBを構築した。標的遺伝子は、C2C12、SP2/0、NIH3T3およびBALB/c 3T3を示すさまざまな細胞において真核化原核生物発現系によって効率的に発現され、遺伝子治療および遺伝子免疫における発現系の潜在的な応用が示唆されている。

To enhance the efficiency of the expression of target gene in eukaryotic cells, one of the strongest prokaryotic expression systems, the T7 RNA polymerase and T7 promoter, was introduced into eukaryotic cells. A duel-plasmid gene expression system of T7 bacteriophage components was developed; one containing the T7 phage RNA polymerase gene under the control of eukaryotic promoter CMV (pCMV-T7pol) and the other (pT7IRES) containing the T7 promoter and T7 terminator as well as EMCV IRES. To test the feasibility of this plasmid system for eukaryotic expression, hepatitis B virus envelop HBV preS2/S was used to construct pT7IRES-HBs. The target genes were expressed efficiently by the eukaryonized prokaryotic expression system in a variety of the cells indicating C2C12, SP2/0, NIH3T3 and BALB/c 3T3, suggesting the potential applications of the expression system in gene therapy and gene immunization.