GFP-FABD2融合コンストラクトは、シロイヌナズナの苗のすべての細胞における動的アクチン細胞骨格のin vivo視覚化を可能にします

シロイヌナズナの苗のすべての細胞における糸状アクチンのin vivo視覚化は、細胞分化の多様なプロセスにおけるアクチン細胞骨格の多くの役割を理解するために不可欠です。マウスタリンのアクチン結合ドメインに基づいた以前に導入されたレポーターコンストラクトは、臓器表面に近い細胞層のこれらの側面のいくつかを解明するのに役立つことが証明されました。しかし、細胞はより深く埋め込まれており、特にオーキシンの極性輸送で活性化された耐節細胞は、融合タンパク質の発現の欠如により、びまん性または蛍光をまったく示しません。同じ問題がルート分裂組織で発生します。最近、A。thalianafimbrin 1とGFPの間の融合に基づいてアクチン記者を導入しましたが、根の分化ゾーンから葉まで臓器の輝かしい結果をもたらしましたが、根元の根元と根キャップの根の移行ゾーンに糸状のアクチン細胞骨格を描写できませんでした。これらの問題を克服するために、in vivoでのF-アクチンの視覚化のために新しいトランスジェニック系統を準備しました。ここでは、A。thalianafimbrin 1のC末端半分に融合したGFPで構成される構成要素が、安定して変換されたA. Thalianaの苗のすべての細胞にF-アクチンの動的配列を明らかにしていることを報告します。

In vivo visualization of filamentous actin in all cells of Arabidopsis thaliana seedlings is essential for understanding the numerous roles of the actin cytoskeleton in diverse processes of cell differentiation. A previously introduced reporter construct based on the actin-binding domain of mouse talin proved to be useful for unravelling some of these aspects in cell layers close to the organ surface. However, cells more deeply embedded, especially stelar cells active in polar transport of auxin, show either diffuse or no fluorescence at all due to the lack of expression of the fusion protein. The same problem is encountered in the root meristem. Recently introduced actin reporters based on fusions between A. thaliana fimbrin 1 and GFP gave brilliant results in organs from the root differentiation zone upwards to the leaves, however failed to depict the filamentous actin cytoskeleton in the transition zone of the root, in the apical meristem and the root cap. To overcome these problems, we have prepared new transgenic lines for the visualization of F-actin in vivo. We report here that a construct consisting of GFP fused to the C-terminal half of A. thaliana fimbrin 1 reveals dynamic arrays of F-actin in all cells of stably transformed A. thaliana seedlings.