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Cytokine2005Sep07Vol.31issue(5)

活性化ラット肝星細胞(HSC)におけるPDGF -A、-B、-C、および-D、およびPDGF受容体アルファとベータの発現パターン

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文献タイプ:
  • Journal Article
  • Research Support, Non-U.S. Gov't
概要
Abstract

多くの生理学的および病態生理学的プロセスを調節する血小板由来の成長因子(PDGF)ファミリーは、最近、2人の新しいメンバー、アイソフォームPDGF-Cと-Dによって拡大されました。肝線維症におけるこれらの新しいメンバーの発現レベルについてはほとんど知られていない。したがって、我々は、PDGFの刺激を伴うまたは伴わない肝線維形成のin vitroモデル系である、肝線維形成のin vitroモデル系である、透過性培養肝細胞(HSC)における透過性培養肝細胞(HSC)における4つのPDGFアイソフォームすべてのmRNA発現プロファイルを定量的リアルタイムPCR(TAQMAN)によって調査しました。-BBまたはTGF-BETA1。4つのアイソフォームはすべて、異なるプロファイルを備えた筋線維芽細胞様細胞(MFB)に分化するHSCで発現しました。PDGF-A mRNAは軽微な変動のみを示しましたが、PDGF-Bは急速にダウンレギュレートされました。対照的に、PDGF-Cと-D mRNAの両方が強く誘導されました:PDGF-Cは2日目から8日目から8日目まで5倍、Cultureの2日目から5日目から5日目までPDGF-D。活性化HSCにおけるPDGF-DDの存在は、免疫細胞化学によりタンパク質レベルで確認されました。PDGF-BBによるHSCおよびMFBの刺激は、新しいアイソフォームのダウンレギュレーションをもたらしましたが、TGF-BETA1はPDGF-Aのみを上方制御しました。さらに、PDGF受容体ベータ(PDGFR-beta)mRNAは培養の最初の日以内に急速に上方制御され、2日目から絶えず発現している一方で、PDGFR-alpha mRNAの発現プロファイルはPDGF-Aの発現プロファイルと非常に類似していたことを示しています。透過性。PDGF-Cと-Dの発現の劇的な変化を考えると、これはPDGF-Bのダウンレギュレーションを補う可能性があるため、新しいPDGFアイソフォームが肝線維形成の特定の機能を満たす可能性があると仮定します。

多くの生理学的および病態生理学的プロセスを調節する血小板由来の成長因子(PDGF)ファミリーは、最近、2人の新しいメンバー、アイソフォームPDGF-Cと-Dによって拡大されました。肝線維症におけるこれらの新しいメンバーの発現レベルについてはほとんど知られていない。したがって、我々は、PDGFの刺激を伴うまたは伴わない肝線維形成のin vitroモデル系である、肝線維形成のin vitroモデル系である、透過性培養肝細胞(HSC)における透過性培養肝細胞(HSC)における4つのPDGFアイソフォームすべてのmRNA発現プロファイルを定量的リアルタイムPCR(TAQMAN)によって調査しました。-BBまたはTGF-BETA1。4つのアイソフォームはすべて、異なるプロファイルを備えた筋線維芽細胞様細胞(MFB)に分化するHSCで発現しました。PDGF-A mRNAは軽微な変動のみを示しましたが、PDGF-Bは急速にダウンレギュレートされました。対照的に、PDGF-Cと-D mRNAの両方が強く誘導されました:PDGF-Cは2日目から8日目から8日目まで5倍、Cultureの2日目から5日目から5日目までPDGF-D。活性化HSCにおけるPDGF-DDの存在は、免疫細胞化学によりタンパク質レベルで確認されました。PDGF-BBによるHSCおよびMFBの刺激は、新しいアイソフォームのダウンレギュレーションをもたらしましたが、TGF-BETA1はPDGF-Aのみを上方制御しました。さらに、PDGF受容体ベータ(PDGFR-beta)mRNAは培養の最初の日以内に急速に上方制御され、2日目から絶えず発現している一方で、PDGFR-alpha mRNAの発現プロファイルはPDGF-Aの発現プロファイルと非常に類似していたことを示しています。透過性。PDGF-Cと-Dの発現の劇的な変化を考えると、これはPDGF-Bのダウンレギュレーションを補う可能性があるため、新しいPDGFアイソフォームが肝線維形成の特定の機能を満たす可能性があると仮定します。

The platelet-derived growth factor (PDGF) family, which regulates many physiological and pathophysiological processes has recently been enlarged by two new members, the isoforms PDGF-C and -D. Little is known about the expression levels of these new members in hepatic fibrosis. We therefore investigated by quantitative real time PCR (Taqman) the mRNA expression profiles of all four PDGF isoforms in transdifferentiating primary cultured hepatic stellate cells (HSC), an in vitro model system of hepatic fibrogenesis, either with or without stimulation of the cells with PDGF-BB or TGF-beta1. All four isoforms were expressed in HSC transdifferentiating to myofibroblast-like cells (MFB) albeit with different profiles: while PDGF-A mRNA exhibited minor fluctuations only, PDGF-B was rapidly down-regulated. In contrast, both PDGF-C and -D mRNA were strongly induced: PDGF-C up to 5 fold from day 2 to day 8 and PDGF-D up to 8 fold from day 2 to day 5 of culture. Presence of PDGF-DD in activated HSC was confirmed at the protein level by immunocytochemistry. Stimulation of HSC and MFB with PDGF-BB led to down-regulation of the new isoforms, whereas TGF-beta1 upregulated PDGF-A only. We further show that PDGF receptor-beta (PDGFR-beta) mRNA was rapidly upregulated within the first day of culture and was constantly expressed from day 2 on while the expression profile of PDGFR-alpha mRNA was very similar to that of PDGF-A during transdifferentiation. Given the dramatic changes in PDGF-C and -D expression, which may compensate for down-regulation of PDGF-B, we hypothesize that the new PDGF isoforms may fulfil specific functions in hepatic fibrogenesis.

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