胚性マウス肺におけるHoechst-Effluxing CD45-およびCD45+細胞の遺伝子発現プロファイリングと局在化

Hoechst-effluxing細胞（側面集団細胞）は、STEMおよび前駆細胞活性に対して非常に濃縮された成体組織に見られる細胞のまれなサブセットです。肺の発生中に潜在的な幹細胞と前駆細胞を特定するために、胚の17.5肺でCD45およびCD45+副集団細胞の遺伝子発現プロファイルを生成しました。側面集団細胞は、17.5日目の肺肺総細胞の1％を占めることがわかりました（55％CD45+、45％CD45-）。遺伝子プロファイリングデータは、CD45側集団内の内皮遺伝子の過剰表現を示しました。いくつかの異なる遺伝子の発現を使用して、2種類のCD45側の集団細胞を特定しました。1）フォンウィルブランド因子+/平滑筋アクチン+細胞は、選択した大血管の筋肉層に存在し、2）フォンウィルブランド因子+/細胞間接着分子+細胞選択した小さな容器の内皮層内に存在します。CD45+側副集団の遺伝子プロファイリングは、骨髄細胞分化に関連する遺伝子の過剰表現を示しています。これと一致して、培養CD45+副集団細胞は、成熟樹状マーカーの誘導と関連していた（CD86）。マイクロアレイの結果は、ミエロペルオキシダーゼとプロテイナーゼ-3の発現を使用してCD45+副集団細胞を特定できることを示唆しています。免疫組織化学により、ミエロペルオキシダーゼ+/プロテイナーゼ-3+細胞は、胚17.5肺の総CD45+細胞の小さなサブセットを表し、それらが間葉系および血管周囲領域に存在することがわかりました。これは、発達中の臓器におけるサイド集団細胞の表現型と局在に関する最初の詳細情報です。

Hoechst-effluxing cells (side population cells) are a rare subset of cells found in adult tissues that are highly enriched for stem and progenitor cell activity. To identify potential stem and progenitor cells during lung development, we generated gene expression profiles for CD45- and CD45+ side population cells in the embryonic day 17.5 lung. We found that side population cells comprise 1% of total embryonic day 17.5 lung cells (55% CD45+, 45% CD45-). Gene profiling data demonstrated an overrepresentation of endothelial genes within the CD45- side population. We used expression of several distinct genes to identify two types of CD45- side population cells: 1) von Willebrand factor+/smooth muscle actin+ cells that reside in the muscular layer of select large vessels and 2) von Willebrand factor+/intercellular adhesion molecule+ cells that reside within the endothelial layer of select small vessels. Gene profiling of the CD45+ side population indicated an overrepresentation of genes associated with myeloid cell differentiation. Consistent with this, culturing CD45+ side population cells was associated with induction of mature dendritic markers (CD86). The microarray results suggested that expression of myeloperoxidase and proteinase-3 might be used to identify CD45+ side population cells. By immunohistochemistry, we found that myeloperoxidase+/proteinase-3+ cells represent a small subset of total CD45+ cells in the embryonic day 17.5 lung and that they reside in the mesenchyme and perivascular regions. This is the first detailed information regarding the phenotype and localization of side population cells in a developing organ.