BMP-7、ID2、またはID3のアデノウイルス遺伝子導入は、マウスにおけるレンズ上皮の損傷誘発性上皮から間葉系の移行を抑制します

骨形成性タンパク質-7（BMP-7）のアデノウイルス媒介発現の効果と、レンズ上皮の損傷誘発性上皮から葉系遷移（EMT）に対する分化2および3（ID2およびID3）の阻害剤の効果を調べました。マウス。ID2とID3は、BMP-7によって上方制御され、SMAD2/3シグナル伝達に拮抗することが知られています。CRE-LOXPシステムアデノウイルス遺伝子導入が使用されました。アデノウイルス溶液の3つのマイクロリットル（2 x 10（7）PFU/mul）を、一般および局所の両方の下で皮下針を使用して誘導されたcapsular損傷時に、成体男性C57BL/6マウス（n = 144）の右レンズに注入されました麻酔。Cre-Adenovirus（CRE-AD）とMBMP-7、MID2、またはMID3をコードするベクターの混合物をテストグループに投与しました。対照レンズは、CRE-ADだけで処理されました。5日間または10日間の癒しの間隔の後、動物を殺した後、レンズから組織プロセスまたはRNA抽出を行いました。RT-PCR、リアルタイムRT-PCR、および免疫組織化学は、レンズに導入された各遺伝子の発現を示しました。外因性BMP-7は、損傷したレンズにおけるID2およびID3の発現を上方制御し、ID2またはID3の遺伝子導入もBMP-7発現を上方制御しました。BMP-7、ID2、またはID3の遺伝子移動は、SMAD2 COOH末端リン酸化の減少に関連したアルファスムース筋アクチンおよびコラーゲンの組織学と発現パターンによって評価されるレンズ上皮細胞の損傷誘発EMTを遅らせました。BMP-7、ID2、またはID3の遺伝子導入は、レンズ上皮細胞の損傷誘発EMTを遅らせ、マウスの繊維組織を伴うcapsular骨切断の密閉。

We have examined the effect of adenovirus-mediated expression of bone morphogenic protein-7 (BMP-7) and inhibitors of differentiation 2 and 3 (Id2 and Id3) on injury-induced epithelial-to-mesenchymal transition (EMT) of lens epithelium in mice. Id2 and Id3 are known to be upregulated by BMP-7 and to antagonize Smad2/3 signaling. The Cre-LoxP system adenoviral gene transfer was used. Three microliters of adenoviral solution (2 x 10(7) PFU/mul) were injected into the right lens of adult male C57BL/6 mice (n = 144) at the time of capsular injury induced using a hypodermic needle under both general and topical anesthesia. A mixture of Cre-adenovirus (Cre-Ad) and vector encoding mBMP-7, mId2, or mId3 was administered in a test group. Control lenses were treated with Cre-Ad alone. After healing intervals of 5 or 10 days, the animals were killed and then we performed histological processes or RNA extraction from the lens. RT-PCR, real-time RT-PCR, and immunohistochemistry showed expression of each introduced gene in the lens. Exogenous BMP-7 upregulated expression of Id2 and Id3 in injured lenses, and gene introduction of Id2 or Id3 also upregulated BMP-7 expression. Gene transfer of BMP-7, Id2, or Id3 delayed injury-induced EMT of the lens epithelial cells as evaluated by histology and expression patterns of alpha-smooth muscle actin and collagens in association with reduction of Smad2 COOH-terminal phosphorylation. Gene transfer of BMP-7, Id2, or Id3 delayed injury-induced EMT of lens epithelial cells and subsequent sealing of the capsular break with fibrous tissue in mice.