ラット大腸炎のTNBSモデルにおけるプロバイオティクス、乳酸塩塩sparivarius SSP唾液の予防効果

目的：腸の抗炎症効果とプロバイオティクスラクトバチルスサリバリウスSSPのメカニズムを調査する。ラット大腸炎のTNBSモデルにおける唾液CECT5713。 方法：この研究では、雌のウィスターラット（180-200 g）を使用しました。ラットのグループを経口投与した。サリバリウス（5x10（8）CFUを0.5 mLのスキムミルクに懸濁したCFU）毎日3週間。参照には、プロバイオティクスの投与に使用される車両を口頭で受け取ったプロバイオティクス治療のない非カリティックとコントロールのコントロールの2つのグループが参照に使用されました。実験を開始してから2週間後、ラットは、0.25 mLの500 mL/Lエタノールに溶解した10 mgのTNBの酸素内投与により、コリティックにレンダリングされました。大腸炎の誘導の1週間後、すべての動物が死亡し、結腸の損傷が組織学的および生化学的に評価されました。結腸ホモジネートで行われた生化学的研究には、ミエロペルオキシダーゼ（MPO）活性、グルタチオン（GSH）含有量、ロイコトリエンB4（LTB4）および腫瘍壊死因子アルファ（TNF-alpha）レベル、および誘導性ニトリックオキシドシンセーゼ（INOS）発現（InoS）発現の測定が含まれます。。さらに、結腸サンプルから得られた管腔内含有量は、乳酸菌とビフィジドバクテリア数を決定するために、微生物学的研究に使用されました。 結果：L。salivarius SSPによるコリティックラットの治療。唾液は、プロバイオティクス治療なしの対応する対照群と比較した場合、コリティックラットの炎症反応の改善をもたらしました。この抗炎症効果は、TNBS/エタノールの投与によって誘発される結腸壊死および/または炎症の程度の有意な減少によって巨視的に証明されました（2.3 +/-- 0.4 cm対対照群では3.4 +/- 0.3 cm、p <<<0.01）および非治療コリティックラットと比較した好中球浸潤の減少に関連する結腸構造の改善により組織学的に。後者は、中球浸潤のマーカーである結腸MPO活性（105.3 +/- 26.0 U/g対180.6 +/- 21.9 U/G、P <0.05）の大幅な減少により生化学的に確認されました。有益な効果は、結腸GSH含有量の増加（1252 +/- 42 nmol/g対1087 +/- 51 nmol/g、p <0.05）の増加に関連していました。炎症プロセスによって引き起こされるストレス。さらに、L. salivariusでのコリティックラットの処理により、結腸TNF-αレベル（509.4 +/- 68.2 pg/g対782.9 +/- 60.1 pg/g、p <0.01）が大幅に減少し、低い結果になり、プロバイオティクス投与のないTNBSコントロール動物と比較した場合、結腸INOS発現。最後に、処理されたコリティックラットは、コントロールコリティックラットよりも結腸含有量の乳酸菌種の数が高いことを示しましたが、ビフィドバクテリア数では違いは観察されませんでした。 結論：プロバイオティクスL.サリバリウスSSPの投与。Salivarius CECT5713は、ラット大腸炎のTNBSモデルにおける炎症組織の回復を促進します。これは、TNF-Alphaなどのサイトカインなど、腸の炎症反応に関与するメディエーターの産生の改善に関連する効果に関連しています。この有益な効果は、この炎症状態で発生する変化した免疫応答に対するその効果に起因する可能性があります。

AIM: To investigate the intestinal anti-inflammatory effect and mechanism of a probiotic Lactobacillus salivarius ssp. salivarius CECT5713 in the TNBS model of rat colitis. METHODS: Female Wistar rats (180-200 g) were used in this study. A group of rats were administered orally the probiotic L. salivarius ssp. salivarius (5x10(8) CFU suspended in 0.5 mL of skimmed milk) daily for 3 wk. Two additional groups were used for reference, a non-colitic and a control colitic without probiotic treatment, which received orally the vehicle used to administer the probiotic. Two weeks after starting the experiment, the rats were rendered colitic by intracolonic administration of 10 mg of TNBS dissolved in 0.25 mL of 500 mL/L ethanol. One week after colitis induction, all animals were killed and colonic damage was evaluated both histologically and biochemically. The biochemical studies performed in colonic homogenates include determination of myeloperoxidase (MPO) activity, glutathione (GSH) content, leukotriene B4 (LTB4) and tumor necrosis factor alpha (TNF-alpha) levels, as well as inducible nitric oxide synthase (iNOS) expression. In addition, the luminal contents obtained from colonic samples were used for microbiological studies, in order to determine Lactobacilli and Bifidobacteria counts. RESULTS: Treatment of colitic rats with L. salivarius ssp. salivarius resulted in amelioration of the inflammatory response in colitic rats, when compared with the corresponding control group without probiotic treatment. This anti-inflammatory effect was evidenced macroscopically by a significant reduction in the extent of colonic necrosis and/or inflammation induced by the administration of TNBS/ethanol (2.3+/-0.4 cm vs 3.4+/-0.3 cm in control group, P<0.01) and histologically by improvement of the colonic architecture associated with a reduction in the neutrophil infiltrate in comparison with non-treated colitic rats. The latter was confirmed biochemically by a significant reduction of colonic MPO activity (105.3+/-26.0 U/g vs 180.6+/-21.9 U/g, P<0.05), a marker of neutrophil infiltration. The beneficial effect was associated with an increase of the colonic GSH content (1252+/-42 nmol/g vs 1087+/-51 nmol/g, P<0.05), which is depleted in colitic rats, as a consequence of the oxidative stress induced by the inflammatory process. In addition, the treatment of colitic rats with L. salivarius resulted in a significant reduction of colonic TNF-alpha levels (509.4+/-68.2 pg/g vs 782.9+/-60.1 pg/g, P<0.01) and in a lower colonic iNOS expression, when compared to TNBS control animals without probiotic administration. Finally, treated colitic rats showed higher counts of Lactobacilli species in colonic contents than control colitic rats, whereas no differences were observed in Bifidobacteria counts. CONCLUSION: Administration of the probiotic L. salivarius ssp. salivarius CECT5713 facilitates the recovery of the inflamed tissue in the TNBS model of rat colitis, an effect associated with amelioration of the production of some of the mediators involved in the inflammatory response in the intestine, such as cytokines, including TNF-alpha and NO. This beneficial effect could be ascribed to its effect on the altered immune response that occurs in this inflammatory condition.