[冷凍セクションを保存する不凍液バッファーに関する実験的研究]

目的：抗フリーズバッファーが免疫細胞化学（ICC）および組織化学の凍結切片を保存するかどうかを調査する。 方法：この研究では、12〜15か月のC57BL/6NIA雌マウス（n = 4）が使用されました。50ミクロンで凍結し、-20度Cで抗フリーズ緩衝液で保存しました。一酸化窒素合成酵素（NOS）を含むニューロンと毛細血管のベータ-NADPH組織化学、星状細胞のGFAP ICCと組み合わせて。 結果：ベータNADPH組織化学で染色された切片の分析により、0日目と6か月の両方で、NOS陽性ニューロンと毛細血管の同等のレベルの染色が明らかになりました。同様に、抗フリーズバッファーに保存され、GFAP ICCで染色された切片は、0、6ヶ月、および12か月で星状細胞の同等の染色を示しました。 結論：これらの発見は、抗凍結緩衝液が、一般的な組織学的およびICC染色手順のためにニューロン、グリア細胞、血管に関連する抗原の長期保存を提供することを確認しています。

OBJECTIVE: To investigate whether anti-freeze buffer preserves frozen sections for immunocytochemistry (ICC) and histochemistry. METHODS: C57BL/6NIA female mice (n = 4) aged 12 - 15 months were used in this study. It was frozen sectioned at 50 micron and stored in anti-freeze buffer at -20 degrees C. At the time of sectioning (Day 0) and after 3 intervals (3, 6, and 12 months) sections through the dentate gyrus were stained with beta-NADPH histochemistry for nitric oxide synthase (NOS) -containing neurons and capillaries, in combination with GFAP ICC for astrocytes. RESULTS: Analysis of the sections stained with beta-NADPH histochemistry revealed an equivalent level of staining for NOS-positive neurons and capillaries at both Day 0 and 6 months. Similarly, sections preserved in anti-freeze buffer and stained with GFAP ICC showed equivalent staining of astrocytes at Day 0, 6 months, and 12 months. CONCLUSION: These findings confirm that anti-freeze buffer provides long-term preservation of antigens associated with neurons, glial cells, and blood vessels for common histological and ICC staining procedures.