クエン酸鉄とチオ硫酸ナトリウム（事実）およびテトラゾリウム赤（TZR）を含むサルモネラのバクテリオファージプラークの強化コントラスト

バクテリオファージプラークの視覚化は、クエン酸鉄およびチオ硫酸ナトリウム（FACST）または2,3,5-トリフェニルテトラゾリウム（テトラゾリウム赤、TZR）を従来のバクテリオファージプラケアッセイの軟寒天層に添加することにより、強化できます。これらの試薬からの背景色は、トリプティカゼ豆腐寒天（TSA）プレートの透明なプラークと濁った宿主芝生とのコントラストを改善しました。FACSTによる強化は、細菌の一部の株によって産生される硫化水素ガス（H2S）との反応に基づいており、ここではH2S+およびH2S株のH2S株を使用してテストしました。ブタのラグーン排水から分離されたバクテリオファージ（ポドビリダ科）を備えたenterica。H2S+ひずみのみが、FACSTにより改善された寒天で暗褐色の黒い色を生成しました。両方の株は、TZRが改善した寒天で明るいピンクがかった赤い色を示しました。両方の試薬の色強度は、試薬の濃度の減少とともに減少しました。FACST改正プレートのコントラストはTZRの場合よりも大きく見えましたが、12時間後に減少しましたが、TZR改正プレートのコントラストは一定のままでした。テストされた濃度では、どちらの試薬もH2S+株のプラーク数に影響を与えませんでした。FACSTは、サルモネラおよび他のH2S+細菌のH2S+株を備えたバクテリオファージプラークアッセイで有用である必要があります。

Visualization of bacteriophage plaques may be enhanced by addition of ferric ammonium citrate and sodium thiosulfate (FACST) or 2,3,5-triphenyltetrazolium chloride (tetrazolium red, TZR) to the soft agar layer of a traditional bacteriophage plaque assay. Background color from these reagents improved contrast between clear plaques and turbid host lawns in trypticase soy agar (TSA) plates. Enhancement by FACST is based on reaction with hydrogen sulfide gas (H2S) produced by some strains of bacteria and was tested here using H2S+ and H2S- strains of Salmonella enterica subsp. enterica with a bacteriophage (Podoviridae) isolated from swine lagoon effluent. Only the H2S+ strain produced dark brown-black color in FACST-amended agar. Both strains showed bright pinkish-red color in TZR-amended agar. Color intensity for both reagents decreased with decreasing concentrations of the reagents. Contrast in FACST-amended plates appeared greater than that with TZR, but diminished after 12 h, while contrast in TZR-amended plates remained constant. At the concentrations tested, neither reagent affected plaque counts in the H2S+ strain. The FACST should be useful in bacteriophage plaque assays with H2S+ strains of Salmonella and other H2S+ bacteria.