MEPEは、歯髄幹細胞が分化するため、ダウンレギュレートされています

非標識：歯髄培養培養に関する以前の研究では、歯原芽細胞に分化し、石灰化象牙質を形成する細胞の不均一性混合物が説明されています。 目的：この研究の目的は、細胞分化に関連する歯髄幹細胞（DPSC）によるマトリックス細胞外ホスホグリコタンパク質（MEPE）発現を特徴付けることでした。 設計：石灰化結節を形成するDPSC分化は、アリザリン赤染色とマイクロラマン分光法によって特徴付けられました。骨形成スーパーアレイ分析を使用して、DPSC分化によって変化した骨形成関連遺伝子を広くスクリーニングしました。MEPEおよびDSPの発現の相対レベルは、半定量的RT-PCRおよびウエスタンブロットによって決定されました。 結果：鉱物分析により、DPSCが分化すると、炭酸ヒドロキシアパタイトミネラルを形成することが示されました。分化は、最初はRUNX2、TGFBETA関連遺伝子、EGFR、およびコラーゲン代謝に関与する遺伝子によるアップレギュレーションによってマークされました。DPSCSが合流点に達したため、ALP活性は最初に増加しましたが、後に細胞が合流してから3週間後にさらに分化したときに減少しました。MEPEは、DPSCが分化するためにダウンレギュレートされた唯一のマーカーでした。 結論：DPSC分化は、DSPなどのDPSC分化の他のマーカーがアップレギュレートされるため、MEPEのダウンレギュレーションによって特徴付けられます。DSPに関連するMEPEの発現は、DPSCを監視するために使用して、腺芽細胞の分化、組織工学、または重要なパルプ療法の研究に使用されます。DPSCとしてのMEPEのダウンレギュレーションは、MEPEが鉱化の阻害剤であることを示唆しています。

UNLABELLED: Previous studies on dental pulp cell culture have described heterogenous mixtures of cells that differentiate into odontoblasts and form mineralized dentin. OBJECTIVE: The aim of this study was to characterize the matrix extracellular phosphoglycoprotein (MEPE) expression by dental pulp stem cells (DPSC), related to cell differentiation. DESIGN: DPSC differentiation to form mineralized nodules was characterized by Alizarin red staining and micro-Raman spectroscopy. Osteogenesis SuperArray analysis was used to broadly screen for osteogenesis-related genes altered by DPSC differentiation. Relative levels of expression of MEPE and DSP were determined by semiquantitative RT-PCR and Western blot. RESULTS: Mineral analysis showed that as DPSC differentiated, they formed a carbonated hydroxyapatite mineral. Differentiation was initially marked by upregulation by Runx2, TGFbeta-related genes, EGFR and genes involved in collagen metabolism. ALP activity first increased, as DPSCs reached confluence but later decreased when cells further differentiated three weeks after confluence. MEPE was the only marker that was downregulated as DPSCs differentiated. CONCLUSION: DPSC differentiation can be characterized by downregulation of MEPE as other markers of DPSC differentiation, such as DSP, are upregulated. Expression of MEPE related to DSP and can be used to monitor DPSC as they are used for studies of odontoblast differentiation, tissue engineering or vital pulp therapy. The downregulation of MEPE as DPSC differentiate, suggests that MEPE is an inhibitor of mineralization.