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Candida rugosa(CRL)およびPseudomonas cepacia(PCL)のリパーゼは、4つのクラウンエーテルと9つのシクロデキストリン(CYD)を含む環状オリゴーターと共同溶解し、有機溶媒におけるエステル交換活性とエナンチオ選択性を評価しました。各添加剤と同時溶解したPCLは、緩衝液のみから凍結乾燥した天然のリパーゼと比較した場合、酵素活性とエナンチオ選択性を同時に増強することを示しました。対照的に、このような強化は、共溶で溶解したCRLで観察されませんでした。調査された環状オリゴーターの中で、最も適切な添加剤としてペルメチル化ベタサイド(ME1.78Betacyd)が、添加剤/リパーゼ比、水性pHを変化させる効果を決定することにより、共凍液化されたPCL調製と反応条件の最適化に使用されました。、有機溶媒の性質、および温度。30度Cのジイソプロピルエーテル中のラセミ2,2-ジメチル-1,3-ジオキソラン-4-メタノールとビニル酪酸との間の交差により決定された初期速度は、最大17倍増加し、Eで表されるエナンチオ選択性は倍増する可能性があります。。温度とエナンチオ選択性の間に逆相関がありましたが、ME1.78BetaCyd-PCL Co-Lyophilizateでは、0度Cでも反応速度が、天然のPCL触媒反応の高温での反応速度よりもはるかに高かった。したがって、この方法は、光学的に活性化合物の大規模な生産に実用的であるようです。
Candida rugosa(CRL)およびPseudomonas cepacia(PCL)のリパーゼは、4つのクラウンエーテルと9つのシクロデキストリン(CYD)を含む環状オリゴーターと共同溶解し、有機溶媒におけるエステル交換活性とエナンチオ選択性を評価しました。各添加剤と同時溶解したPCLは、緩衝液のみから凍結乾燥した天然のリパーゼと比較した場合、酵素活性とエナンチオ選択性を同時に増強することを示しました。対照的に、このような強化は、共溶で溶解したCRLで観察されませんでした。調査された環状オリゴーターの中で、最も適切な添加剤としてペルメチル化ベタサイド(ME1.78Betacyd)が、添加剤/リパーゼ比、水性pHを変化させる効果を決定することにより、共凍液化されたPCL調製と反応条件の最適化に使用されました。、有機溶媒の性質、および温度。30度Cのジイソプロピルエーテル中のラセミ2,2-ジメチル-1,3-ジオキソラン-4-メタノールとビニル酪酸との間の交差により決定された初期速度は、最大17倍増加し、Eで表されるエナンチオ選択性は倍増する可能性があります。。温度とエナンチオ選択性の間に逆相関がありましたが、ME1.78BetaCyd-PCL Co-Lyophilizateでは、0度Cでも反応速度が、天然のPCL触媒反応の高温での反応速度よりもはるかに高かった。したがって、この方法は、光学的に活性化合物の大規模な生産に実用的であるようです。
Lipases from Candida rugosa (CRL) and Pseudomonas cepacia (PCL) were co-lyophilized with cyclic oligoethers including four crown ethers and nine cyclodextrins (CyDs), and their transesterification activity and enantioselectivity in organic solvents were evaluated. The PCL co-lyophilized with each additive showed simultaneously enhanced enzyme activity and enantioselectivity when compared to the native lipase lyophilized from buffer alone; in contrast, such enhancement was not observed for the co-lyophilized CRL. Among the cyclic oligoethers examined, permethylated betaCyD (Me1.78betaCyD), as the most suitable additive, was used for the optimization of both the co-lyophilized PCL preparation and reaction conditions by determining the effects of varying the additive/lipase ratio, aqueous pH, the nature of organic solvents, and temperature. The initial rate determined for the transesterification between racemic 2,2-dimethyl-1,3-dioxolane-4-methanol and vinyl butyrate in diisopropyl ether at 30 degrees C increased by up to 17-fold and the enantioselectivity represented by E could be doubled. While there was an inverse correlation between temperature and enantioselectivity, with the Me1.78betaCyD-PCL co-lyophilizate, the reaction rate even at 0 degrees C was much higher than that at higher temperatures in the native PCL-catalyzed reaction. Hence, this method seems to be of practical use for the large-scale production of optically active compounds.
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