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Antimicrobial agents and chemotherapy2005Nov01Vol.49issue(11)

Pseudomonas aeruginosa amprは、AMPCおよびPoxBベータラクタマーゼ、プロテアーゼ、定足数センシング、およびその他の病原性因子の発現を調節するグローバルな転写因子です。

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文献タイプ:
  • Journal Article
  • Research Support, N.I.H., Extramural
  • Research Support, Non-U.S. Gov't
  • Research Support, U.S. Gov't, P.H.S.
概要
Abstract

腸内菌科のメンバーでは、ベータラクタマーゼをコードするAMPCは、上流の分岐した転写された遺伝子AMPRによって調節されています。ただし、緑膿菌では、AMPCの調節は理解されていません。この研究では、緑膿菌AMPR変異体PaoAmprの特性と同一性AMPR+親の特性を比較しました。AMPR変異により、AMPC産生が大幅に変化しました。抗生物質がない場合、PaoAmprは基底ベータラクタマーゼレベルの増加を発現しました。ただし、この増加に続いて、P(AMPC)プロモーター活性の付随的な増加はありませんでした。タンパク質と転写分析の矛盾により、別の染色体AMPR調節ベータラクタマーゼPOXBの存在を発見するようになりました。緑膿菌AMPRの発現は、大腸菌のAMPCおよびPOXBからのベータラクタマーゼ産生を大幅に変化させることがわかりました。さらに、PaoAmprの構成的P(AMPR)プロモーター活性は、AMPRが誘導者の非存在下または存在下で自己調節しないことを示しました。さらに、AMPR変異を運ぶ株が野生型株よりも高いレベルのピオシアニンとLASAプロテアーゼとLASBエラスターゼのより低いレベルを生成したため、AMPRがグローバルレギュレーターであることを実証しました。LASAレベルの増加は、P(LASA)、P(LASI)、およびP(LASR)発現と正の相関がありました。LASB活性の減少は、P(RHLR)発現と正の相関がありました。したがって、AMPRは二重の役割を果たし、AMPC、LASB、およびRHLR発現レベルを積極的に調節し、POXB、LASA、LASI、およびLASR発現レベルを負に調節します。

腸内菌科のメンバーでは、ベータラクタマーゼをコードするAMPCは、上流の分岐した転写された遺伝子AMPRによって調節されています。ただし、緑膿菌では、AMPCの調節は理解されていません。この研究では、緑膿菌AMPR変異体PaoAmprの特性と同一性AMPR+親の特性を比較しました。AMPR変異により、AMPC産生が大幅に変化しました。抗生物質がない場合、PaoAmprは基底ベータラクタマーゼレベルの増加を発現しました。ただし、この増加に続いて、P(AMPC)プロモーター活性の付随的な増加はありませんでした。タンパク質と転写分析の矛盾により、別の染色体AMPR調節ベータラクタマーゼPOXBの存在を発見するようになりました。緑膿菌AMPRの発現は、大腸菌のAMPCおよびPOXBからのベータラクタマーゼ産生を大幅に変化させることがわかりました。さらに、PaoAmprの構成的P(AMPR)プロモーター活性は、AMPRが誘導者の非存在下または存在下で自己調節しないことを示しました。さらに、AMPR変異を運ぶ株が野生型株よりも高いレベルのピオシアニンとLASAプロテアーゼとLASBエラスターゼのより低いレベルを生成したため、AMPRがグローバルレギュレーターであることを実証しました。LASAレベルの増加は、P(LASA)、P(LASI)、およびP(LASR)発現と正の相関がありました。LASB活性の減少は、P(RHLR)発現と正の相関がありました。したがって、AMPRは二重の役割を果たし、AMPC、LASB、およびRHLR発現レベルを積極的に調節し、POXB、LASA、LASI、およびLASR発現レベルを負に調節します。

In members of the family Enterobacteriaceae, ampC, which encodes a beta-lactamase, is regulated by an upstream, divergently transcribed gene, ampR. However, in Pseudomonas aeruginosa, the regulation of ampC is not understood. In this study, we compared the characteristics of a P. aeruginosa ampR mutant, PAOampR, with that of an isogenic ampR+ parent. The ampR mutation greatly altered AmpC production. In the absence of antibiotic, PAOampR expressed increased basal beta-lactamase levels. However, this increase was not followed by a concomitant increase in the P(ampC) promoter activity. The discrepancy in protein and transcription analyses led us to discover the presence of another chromosomal AmpR-regulated beta-lactamase, PoxB. We found that the expression of P. aeruginosa ampR greatly altered the beta-lactamase production from ampC and poxB in Escherichia coli: it up-regulated AmpC but down-regulated PoxB activities. In addition, the constitutive P(ampR) promoter activity in PAOampR indicated that AmpR did not autoregulate in the absence or presence of inducers. We further demonstrated that AmpR is a global regulator because the strain carrying the ampR mutation produced higher levels of pyocyanin and LasA protease and lower levels of LasB elastase than the wild-type strain. The increase in LasA levels was positively correlated with the P(lasA), P(lasI), and P(lasR) expression. The reduction in the LasB activity was positively correlated with the P(rhlR) expression. Thus, AmpR plays a dual role, positively regulating the ampC, lasB, and rhlR expression levels and negatively regulating the poxB, lasA, lasI, and lasR expression levels.

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