MALDI-MS/MSを使用した脳組織におけるホスファチジルコリンのその場構造特性

ホスファチジルコリン（PC）は、リン脂質の最も豊富なクラスの1つであり、生物系の膜の主要な成分です。最近、PCはMALDI-TOFMSを使用した直接組織分析によって検出されました。しかし、これらの研究では、組織内のPCの構造的特性評価は許可されていませんでした。現在の研究では、脳組織におけるPC種の検出および構造分析のためのin situ方法が、MALDI-TOF/TOF質量分析計を使用して開発されました。組織内の脂質の初期プロファイリングは、PC種の割り当てを可能にするMALDI-TOFMSによって行われます。ただし、組織で検出されたPC種の構造を確認するために、MALDI-MS/MS分析が採用されました。この研究では、DHAマトリックスを使用して、脳組織でプロトン化、シュダイテッド、および分類されたPC種が検出されました。これらの種のMALDI-MS/MS分析は、ホスホコリンヘッドグループを検証する断片を生成しましたが、アシル置換基の同定を可能にする断片を供給しませんでした。より多くの構造情報を取得するために、塩化リチウム100 mmに溶解したDHAマトリックスを使用して、PC種のリチウム付加物を生成しました。岩石化PC種のMALDI-MS/MS分析は、PC種のアシル基の識別と位置割り当てを可能にする断片を生成しました。

Phosphatidylcholine (PC) is one of the most abundant classes of phospholipids and is a major component of membranes in biological systems. Recently, PCs have been detected by direct tissue analysis using MALDI-TOFMS. However, these studies did not allow for the structural characterization of PCs in tissue. In the current study, an in situ method for detection and structural analysis of PC species in brain tissue was developed using a MALDI-TOF/TOF mass spectrometer. Initial profiling of lipids in tissue is performed by MALDI-TOFMS, which allows for the assignment of PC species. However, to confirm the structure of the PC species detected in tissue, MALDI-MS/MS analysis was employed. In this work, protonated, sodiated, and potassiated PC species were detected in brain tissue using DHA matrix. MALDI-MS/MS analysis of these species yielded fragments that verified a phosphocholine head group, but did not supply any fragments that would permit the identification of acyl substituents. To obtain more structural information, lithium adducts of PC species were produced using DHA matrix dissolved in 100 mM lithium chloride. MALDI-MS/MS analysis of lithiated PC species produced fragments that allowed for the identification and positional assignment of acyl groups in PC species.