アフリカアフリカ型卵母細胞および胚におけるショウジョウバエの翼のないタンパク質の分泌および誘導特性

その脊椎動物のホモログであるXenopus Wnt-8およびマウスWnt-1と同様に、ショウジョウバエ翼のない（WG）タンパク質は、mRNA注射後のアフリカアキュニアレビスの胚で過剰発現すると軸の重複を引き起こすことがわかります。多くの場合、二次軸には目とセメント腺が含まれており、これは最も背面中胚葉型である前皮の中胚葉の誘導を反映しています。軸の重複の程度が発現の胚部位に依存しており、腹側発現は軸の分岐点のより後方点につながることを示します。観察された重複は、UV照射された胚の救助によって示されるように、新しい軸のde novo生成によるものです。WGタンパク質の真の背側中胚葉誘導特性は、32セル胚のD層細胞へのmRNA注射後に広範な重複を生成する能力によって示されます。系統マッピングによって明らかにされたように、これらのD細胞の子孫の大部分は内胚葉に浸透しています。この段階での動物芽腫性への注射は、二次軸を誘導するのにはるかに効果的ではありません。ただし、孤立した動物の帽子脱植片で発現すると、塩基性線維芽細胞成長因子が添加されない限り、WGタンパク質は腹側中胚葉のみを誘導します。無傷の胚では、WGは他の要因と協力して軸の重複を引き起こすと結論付けています。胚の免疫局在研究は、WGタンパク質がそれを合成する芽球に局在したままであり、これらの細胞内に斑状の、しばしば核周囲分布を持っていることを示していますが、一部は表面に到達します。卵母細胞では、WGタンパク質のプールは完全に細胞内で比較的不安定です。ポリアニオンスラミンが追加されると、細胞内材料のほとんどが外部培地で回収されます。

Like its vertebrate homologues, Xenopus wnt-8 and murine wnt-1, we find that Drosophila wingless (wg) protein causes axis duplication when overexpressed in embryos of Xenopus laevis after mRNA injection. In many cases, the secondary axes contain eyes and cement glands, which reflect the induction of the most dorsoanterior mesodermal type, prechordal mesoderm. We show that the extent of axis duplication is dependent on the embryonic site of expression, with ventral expression leading to a more posterior point of axis bifurcation. The observed duplications are due to de novo generation of new axes as shown by rescue of UV-irradiated embryos. The true dorsal mesoderm-inducing properties of wg protein are indicated by its ability to generate extensive duplications after mRNA injection into D-tier cells of 32-cell embryos. As revealed by lineage mapping, the majority of these D cell progeny populate the endoderm; injections into animal blastomeres at this stage are far less effective in inducing secondary axes. However, when expressed in isolated animal cap explants, wg protein induces only ventral mesoderm, unless basic fibroblast growth factor is added, whereupon induction of muscle and occasionally notochord is seen. We conclude that in intact embryos, wg acts in concert with other factors to cause axis duplication. Immunolocalisation studies in embryos indicate that wg protein remains localised to the blastomeres synthesizing it and has a patchy, often perinuclear distribution within these cells, although some gets to the surface. In oocytes, the pool of wg protein is entirely intracellular and relatively unstable. When the polyanion suramin is added, most of the intracellular material is recovered in the external medium.