SORLA/LR11のサイトゾルドメインとアミロイド前駆体タンパク質（APP）およびベータセクレターゼベータサイトアプリクリーブ酵素との相互作用

Sorlaは、APPと相互作用し、その細胞内輸送と処理に影響を与えることが知られているアミロイド前駆体タンパク質（APP）の最近同定されたニューロン受容体（APP）です。アルツハイマー病患者（AD）患者の脳におけるソルラのレベルの低下と、ソルラ欠損マウスのアミロイドベータペプチド（ABETA）のレベルの上昇は、この神経変性障害における受容体の重要性を示しています。App-Shedding AssayでAPPの切断を分析し、驚くべきことに、驚くべきことに、ベータサイトアプリクリーブ酵素（BACE）依存的にSorla Tail Construction Appの切断を阻害したことがわかりました。この発見に沿って、SorlaとSorla TailはBaceが過剰発現したときに分泌されたAbetaレベルを大幅に減少させ、Sorlaがベータ切断に影響を与えることを示唆しています。BACEによるアプリの切断に対するSorlaの効果を理解するために、SorlaがAPPおよび/またはBACEと相互作用するかどうかを分析しました。フルレングスのSorlaとSorla C末端尾部の両方がAPP処理に機能的に関連していたため、潜在的な細胞質相互作用ドメインについてSorla-Appを分析しました。SORLAとC99は、SORLAとAPPの間に新しい細胞質相互作用部位の存在を指して、共免疫沈降しました。さらに、SorlaとBaceも共免疫沈降します。したがって、SorlaはBACEとAPPの両方と相互作用するため、BACE-APP複合体の形成に直接影響する可能性があります。SorlaがBACE-APP相互作用に影響を与えるかどうかをテストするために、蛍光共鳴エネルギー伝達アッセイを使用して、細胞内のBACE-APP相互作用を評価しました。SorlaがゴルジュのBACE-APP相互作用を大幅に減少させることを発見しました。SORLAは、BACE-APP相互作用を防ぐための人身売買受容体として機能し、したがってBACE APPの切断を防ぐと仮定します。

sorLA is a recently identified neuronal receptor for amyloid precursor protein (APP) that is known to interact with APP and affect its intracellular transport and processing. Decreased levels of sorLA in the brain of Alzheimer's disease (AD) patients and elevated levels of amyloid-beta peptide (Abeta) in sorLA-deficient mice point to the importance of the receptor in this neurodegenerative disorder. We analyzed APP cleavage in an APP-shedding assay and found that both sorLA and, surprisingly, a sorLA tail construct inhibited APP cleavage in a beta-site APP-cleaving enzyme (BACE)-dependent manner. In line with this finding, sorLA and the sorLA tail significantly reduced secreted Abeta levels when BACE was overexpressed, suggesting that sorLA influences beta-cleavage. To understand the effect of sorLA on APP cleavage by BACE, we analyzed whether sorLA interacts with APP and/or BACE. Because both full-length sorLA and sorLA C-terminal tail constructs were functionally relevant for APP processing, we analyzed sorLA-APP for a potential cytoplasmatic interaction domain. sorLA and C99 coimmunoprecipitated, pointing toward the existence of a new cytoplasmatic interaction site between sorLA and APP. Moreover, sorLA and BACE also coimmunoprecipitate. Thus, sorLA interacts both with BACE and APP and might therefore directly affect BACE-APP complex formation. To test whether sorLA impacts BACE-APP interactions, we used a fluorescence resonance energy transfer assay to evaluate BACE-APP interactions in cells. We discovered that sorLA significantly reduced BACE-APP interactions in Golgi. We postulate that sorLA acts as a trafficking receptor that prevents BACE-APP interactions and hence BACE cleavage of APP.