ジヒドロピリジン結合の陽性ヘテロトロピックアロステリック調節因子は、新規Ca2+拮抗薬BM 2011400によるL型Ca2+チャネルの立体選択的逆転のCa2+親和性を増加させます

電圧依存性L型Ca2+チャネルのアルファ1サブユニットには、異なる化学クラス（ジヒドロピリジン、ベンゾチアゼピン、フェニルアルキルアミン、ジフェニルブチルピペリジン）の薬物の異なるアロステリックな結合結合ドメインがあります。（ - ）-BM 20.1140（エチル-2,2-ジフェニル-4-（1-ピロリジーノ）-5-（2-ピコリル） - 酸素バレート）は、ジヒドロピリジン結合を強力に刺激する新規Ca2+チャネルブロッカーです（K0.5= 2.98 nm）脳膜へ。このプロパティは（+） - cis-diltiazem、（+） - tetrandrine、fostedil、trans-diclofurimeによって共有されますが、（ - ） - BM 20.1140は、（+） - cis-によってラベル付けされたサイトに競争力のある方法で結合しません。[3H]ディルティアゼム。（+） - cis-diltiazemおよび（ - ）-BM 20.1140は、ジヒドロピリジン結合の速度定数に異なる効果があります。（+）-BM 20.1140は、陽性アロステリック調節因子の刺激を逆転させます（（ - ） - BM 20.1140刺激の反転のPA2値= 7.4、勾配0.72）。ジヒドロピリジン結合の増強の基礎となる分子メカニズムは明らかにされています。ウサギの骨格筋からの精製されたL型チャネル上のジヒドロピリジンの高親和性結合ドメインを安定させるための無料のCa2+のK0.5は300 nmです。（+） - テトランチン（10ミクロム）は、アフィニティを8倍に増加させます（遊離Ca2+ = 30.1 nmでK0.5）および（+）-BM 20.114（10 microM）は親和性の増加を阻害します（無料Ca2+ = 251のK0.5nm）。同様の結果は、骨格筋と比較して、遊離Ca2+（K0.5）およびジヒドロピリジンに対して、遊離Ca2+（K0.5）およびジヒドロピリジンに対してより高い親和性を持つ脳組織からの膜結合Ca（2+）で得られました。ジヒドロピリジンとCa（2+） - 結合部位は、アルファ1サブユニットと相互依存していると仮定されています。これは、異なる陽性の異系異性体アロステリック調節因子（Ca2+レート定数に対する微分効果によって）がチャネル孔とCa2+のCa2+の調整を最適化することであり、、次に、ジヒドロピリジンに対する親和性を高めます。

The alpha 1-subunit of the voltage-dependent L-type Ca2+ channel has distinct, allosterically coupled binding domains for drugs from different chemical classes (dihydropyridines, benzothiazepines, phenylalkylamines, diphenylbutylpiperidines). (-)-BM 20.1140 (ethyl-2,2-di-phenyl-4-(1-pyrrolidino)-5-(2-picolyl)- oxyvalerate) is a novel Ca2+ channel blocker which potently stimulates dihydropyridine binding (K0.5 = 2.98 nM) to brain membranes. This property is shared by (+)-cis-diltiazem, (+)-tetrandrine, fostedil and trans-diclofurime, but (-)-BM 20.1140 does not bind in a competitive manner to the sites labeled by (+)-cis-[3H]diltiazem. (+)-cis-Diltiazem and (-)-BM 20.1140 have differential effects on the rate constants of dihydropyridine binding. (+)-BM 20.1140 reverses the stimulation of the positive allosteric regulators (pA2 value for reversal of (-)-BM 20.1140 stimulation = 7.4, slope 0.72). The underlying molecular mechanism of the potentiation of dihydropyridine binding has been clarified. The K0.5 for free Ca2+ to stabilize a high affinity binding domain for dihydropyridines on purified L-type channels from rabbit skeletal muscle is 300 nM. (+)-Tetrandine (10 microM) increases the affinity 8-fold (K0.5 for free Ca2+ = 30.1 nM) and (+)-BM 20.114 (10 microM) inhibits the affinity increase (K0.5 for free Ca2+ = 251 nM). Similar results were obtained with membrane-bound Ca(2+)-channels from brain tissue which have higher affinity for free Ca2+ (K0.5 for free Ca2+ = 132 nM) and for dihydropyridines compared with skeletal muscle. It is postulated that the dihydropyridine and Ca(2+)-binding sites are interdependent on the alpha 1-subunit, that the different positive heterotropic allosteric regulators (by their differential effects on Ca2+ rate constants) optimize coordination for Ca2+ in the channel pore and, in turn, increase affinity for the dihydropyridines.