合成ヘパリンオリゴ糖のマイクロアレイ

さまざまな生物学的プロセスに関与するヘパリン - タンパク質相互作用を解明するために、合成ヘパリンオリゴ糖を含むマイクロアレイの最初の調製を提示します。この目的のために、私たちは、高度に硫酸化オリゴ糖の合成に必要な保護グループ操作と互換性のある新しいリンカー戦略を開発しました。また、自動固相アプローチに拡張することもできます。直交保護されたアミンリンカーの戦略的配置は、アレイ構造の成功の鍵でした。これらのヘパリンチップは、タンパク質のほぼピコモルを使用することにより、オリゴ糖のハイスループットスクリーニングを可能にします。新しい方法の可能性は、いくつかの腫瘍の発生と分化に関係する2つのヘパリン結合成長因子、FGF-1およびFGF-2の炭水化物親和性を調査することにより実証されました。

We present the first preparation of microarrays containing synthetic heparin oligosaccharides in order to elucidate the heparin-protein interactions involved in a variety of biological processes. For this purpose, we have developed a novel linker strategy that is compatible with the protecting-group manipulations required for the synthesis of the highly sulfated oligosaccharides and can also be extended to an automated solid phase approach. Strategic placement of the orthogonally protected amine linker was key to the success of the array construction. These heparin chips allow for the high-throughput screening of oligosaccharides by using approximately picomoles of protein. The potential of the new method was demonstrated by probing the carbohydrate affinity of two heparin-binding growth factors, FGF-1 and FGF-2, that are implicated in the development and differentiation of several tumors.