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Plant physiology1987Dec01Vol.85issue(4)

除草剤スルホメチュロンメチルに対する耐性を付与するクラミドモナスreinhardtiiの変異

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文献タイプ:
  • Journal Article
概要
Abstract

除草剤スルホメチュロンメチル(SM)に耐性のあるChlamydomonas reinhardtii変異体が分離され、特徴付けられました。C. reinhardtiiの成長は、1ミクロモルの濃度でのSMによる阻害に敏感です。10〜100倍の高濃度に耐性のある4つの変異体が分離されました。すべてが、細胞抽出物における特定の活性が野生型酵素の特定の活性よりもSMに対して100〜1000倍の耐性であるアセトラクト酸塩シンターゼ(ALS)を持っています。SMの非存在下では、ALS特異的活性が異常に低い変異体のみがありました。すべての変異は、核ゲノムの単一病変として遺伝され、ヘテロ接合二倍体で発現しました。2つの株の変異は、ストレプトマイシン抵抗性から約30センチモルガンとセントロメアの同じ側で、および変異体間の遺伝的交差では分離が観察されなかった。したがって、すべての変異は、遺伝子SMR-1に暫定的に割り当てられています。除草剤耐性は、この生物における分子形質転換のための選択可能なマーカーとして適しているようです。

除草剤スルホメチュロンメチル(SM)に耐性のあるChlamydomonas reinhardtii変異体が分離され、特徴付けられました。C. reinhardtiiの成長は、1ミクロモルの濃度でのSMによる阻害に敏感です。10〜100倍の高濃度に耐性のある4つの変異体が分離されました。すべてが、細胞抽出物における特定の活性が野生型酵素の特定の活性よりもSMに対して100〜1000倍の耐性であるアセトラクト酸塩シンターゼ(ALS)を持っています。SMの非存在下では、ALS特異的活性が異常に低い変異体のみがありました。すべての変異は、核ゲノムの単一病変として遺伝され、ヘテロ接合二倍体で発現しました。2つの株の変異は、ストレプトマイシン抵抗性から約30センチモルガンとセントロメアの同じ側で、および変異体間の遺伝的交差では分離が観察されなかった。したがって、すべての変異は、遺伝子SMR-1に暫定的に割り当てられています。除草剤耐性は、この生物における分子形質転換のための選択可能なマーカーとして適しているようです。

Chlamydomonas reinhardtii mutants resistant to the herbicide sulfometuron methyl (SM) were isolated and characterized. Growth of C. reinhardtii is sensitive to inhibition by SM at a concentration of 1 micromolar. Four mutants resistant to 10- to 100-fold higher concentrations were isolated. All possess a form of acetolactate synthase (ALS) whose specific activity in cell extracts is 100- to 1000-fold more resistant to SM than is the specific activity of wild-type enzyme. Only one mutant had abnormally low ALS specific activity in the absence of SM. All mutations were inherited as single lesions in the nuclear genome and were expressed in heterozygous diploids. The mutations in two strains mapped to linkage group IX about 30 centimorgans from streptomycin resistance and on the same side of the centromere, and in genetic crosses between mutants no segregation was observed. Accordingly, all mutations are tentatively assigned to gene smr-1. Herbicide resistance appears to be suitable as a selectable marker for molecular transformation in this organism.

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