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クロロホルム/TRIS-HCLバッファー(クロロホルム/バッファー)を使用した多くのグラム陰性細菌とlysodeikticus(クロロホルム/バッファー)を採取することにより得られたペプチドグリカン基質の6つの異なるリゾチームの特異性を調査しました。リゾチームには、市販の2つ(ヘンエッグホワイトリゾチームまたはHEWL、ストレプトマイセスグロビスポラスまたはM1Lのムタノリシン)と、クロマトグラフィーで精製された4つ(バクテリオファージラムダリソチームまたはラル、ラル、バクテリオファージT4 lysozymeまたはt4L、go white lyzey、およびカリフラワーリゾチームまたはCFL)。HEWLは、GRAM陰性の細胞壁よりもM. lysodeikticusの方がはるかに効果的でしたが、LALの反対が見つかりました。また、グラム陰性の細胞壁は、大腸菌やサルモネラ・チフミュリウムなどの密接に関連する種でさえ、異なるリゾチームに対する感受性の顕著な違いを示しました。これらの違いは、クロロホルム抽出がこの阻害剤を効果的に除去することを示したため、細胞壁基質の大腸菌のIVYなどのリゾチーム阻害剤の存在によるものではありません。興味深いことに、我々は、サルモネラ・チフミュリウムのクロロホルム/緩衝抽出物におけるHEWL、および緑膿菌の抽出物のLALに強い阻害活性を発見し、IVYよりも他のリゾチーム阻害剤が存在し、おそらくグラムネジャンブ菌においてwideadであることを示唆しています。
クロロホルム/TRIS-HCLバッファー(クロロホルム/バッファー)を使用した多くのグラム陰性細菌とlysodeikticus(クロロホルム/バッファー)を採取することにより得られたペプチドグリカン基質の6つの異なるリゾチームの特異性を調査しました。リゾチームには、市販の2つ(ヘンエッグホワイトリゾチームまたはHEWL、ストレプトマイセスグロビスポラスまたはM1Lのムタノリシン)と、クロマトグラフィーで精製された4つ(バクテリオファージラムダリソチームまたはラル、ラル、バクテリオファージT4 lysozymeまたはt4L、go white lyzey、およびカリフラワーリゾチームまたはCFL)。HEWLは、GRAM陰性の細胞壁よりもM. lysodeikticusの方がはるかに効果的でしたが、LALの反対が見つかりました。また、グラム陰性の細胞壁は、大腸菌やサルモネラ・チフミュリウムなどの密接に関連する種でさえ、異なるリゾチームに対する感受性の顕著な違いを示しました。これらの違いは、クロロホルム抽出がこの阻害剤を効果的に除去することを示したため、細胞壁基質の大腸菌のIVYなどのリゾチーム阻害剤の存在によるものではありません。興味深いことに、我々は、サルモネラ・チフミュリウムのクロロホルム/緩衝抽出物におけるHEWL、および緑膿菌の抽出物のLALに強い阻害活性を発見し、IVYよりも他のリゾチーム阻害剤が存在し、おそらくグラムネジャンブ菌においてwideadであることを示唆しています。
We have investigated the specificity of six different lysozymes for peptidoglycan substrates obtained by extraction of a number of gram-negative bacteria and Micrococcus lysodeikticus with chloroform/Tris-HCl buffer (chloroform/buffer). The lysozymes included two that are commercially available (hen egg white lysozyme or HEWL, and mutanolysin from Streptomyces globisporus or M1L), and four that were chromatographically purified (bacteriophage lambda lysozyme or LaL, bacteriophage T4 lysozyme or T4L, goose egg white lysozyme or GEWL, and cauliflower lysozyme or CFL). HEWL was much more effective on M. lysodeikticus than on any of the gram-negative cell walls, while the opposite was found for LaL. Also the gram-negative cell walls showed remarkable differences in susceptibility to the different lysozymes, even for closely related species like Escherichia coli and Salmonella Typhimurium. These differences could not be due to the presence of lysozyme inhibitors such as Ivy from E. coli in the cell wall substrates because we showed that chloroform extraction effectively removed this inhibitor. Interestingly, we found strong inhibitory activity to HEWL in the chloroform/buffer extracts of Salmonella Typhimurium, and to LaL in the extracts of Pseudomonas aeruginosa, suggesting that other lysozyme inhibitors than Ivy exist and are probably widespread in gram-negative bacteria.
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