ヒトの不死化卵巣表面上皮および卵巣癌細胞のゴナドトロピンによるゴナドトロピン放出ホルモンメッセンジャーリボ核酸の2つの形態の微分調節

ゴナドトロピン放出ホルモン（GNRH）は、卵巣表面上皮および卵巣癌の細胞増殖のオートクリン/パラクリン調節因子としての役割を果たすことが示されていますが、これらの細胞のGNRHとその受容体の発現を調節する因子は、よく特徴付けられていません。本研究では、リアルタイムPCRを採用して、GNRH I（哺乳類GNRH）、GNRH II（GNRHの2番目の形式）の発現レベルに対するゴナドトロピンの潜在的な調節効果を決定しました。卵巣表面上皮（IOSE-80およびIOSE-80PC）細胞および卵巣癌細胞株（A2780、BG-1、CAOV-3、OVCAR-3およびSKOV-3）。細胞は、組換え卵胞刺激ホルモン（FSH）または黄体形成ホルモン（LH）の濃度（100および1000 ng/mL）で24時間処理されました。FSHまたはLHによる治療は、IOSE細胞株の両方と5つの卵巣癌細胞株の両方でGNRH II mRNAレベルを減少させました（A2780、BG-1およびOVCAR-3）。FSHまたはLHでの治療後、CAOV-3細胞を除き、IOSEおよび卵巣癌細胞では、GNRHR mRNAレベルの有意な減少が観察されました。対照的に、FSHまたはLHのいずれかでの治療は、これらの細胞のGnRH I mRNAレベルに影響を与えず、ゴナドトロピンがGnRHとその受容体の2つの形態を微妙に調節することを示唆しています。別々の実験では、IOSE-80、OVCAR-3およびSKOV-3細胞のGnRH IおよびGnRH IIアゴニストの抗増殖作用に対するゴナドトロピンの効果を調査しました。細胞をFSHまたはLH（100 ng/mL）で24時間前処理し、その後2日間GNRH IまたはGNRH II（100 ng/mL）で2日間処理し、細胞の成長をMTTによって評価しました[3-（4,5-ジメチルチアゾール-2-イル）-2,5-ジフェニルテトラゾリウムブロマイド]アッセイ。FSHまたはLHによる細胞の前処理は、これらの細胞型におけるGNRH IおよびGNRH IIアゴニストの成長阻害効果を大幅に逆転させました。これらの結果は、正常な卵巣表面上皮とその腫瘍性対応物の成長調節におけるゴナドトロピンとGNRH系との間の潜在的な相互作用の最初の実証を提供します。

Although gonadotropin-releasing hormone (GnRH) has been shown to play a role as an autocrine/ paracrine regulator of cell growth in ovarian surface epithelium and ovarian cancer, the factors which regulate the expression of GnRH and its receptor in these cells are not well characterized. In the present study, we employed real-time PCR to determine the potential regulatory effect of gonadotropins on the expression levels of GnRH I (the mammalian GnRH), GnRH II (a second form of GnRH) and their common receptor (GnRHR) in immortalized ovarian surface epithelial (IOSE-80 and IOSE-80PC) cells and ovarian cancer cell lines (A2780, BG-1, CaOV-3, OVCAR-3 and SKOV-3). The cells were treated with increasing concentrations (100 and 1000 ng/ml) of recombinant follicle-stimulating hormone (FSH) or luteinizing hormone (LH) for 24 h. Treatment with FSH or LH reduced GnRH II mRNA levels in both IOSE cell lines and in three out of five ovarian cancer cell lines (A2780, BG-1 and OVCAR-3). A significant decrease in GnRHR mRNA levels was observed in IOSE and ovarian cancer cells, except CaOV-3 cells, following treatment with FSH or LH. In contrast, treatment with either FSH or LH had no effect on GnRH I mRNA levels in these cells, suggesting that gonadotropins regulate the two forms of GnRH and its receptor differentially. In separate experiments, the effect of gonadotropins on the anti-proliferative action of GnRH I and GnRH II agonists in IOSE-80, OVCAR-3 and SKOV-3 cells was investigated. The cells were pretreated with FSH or LH (100 ng/ml) for 24 h after which they were treated with either GnRH I or GnRH II (100 ng/ml) for 2 days, and cell growth was assessed by the MTT [3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazoliumbromide] assay. Pretreatment of the cells with FSH or LH significantly reversed the growth inhibitory effect of GnRH I and GnRH II agonists in these cell types. These results provide the first demonstration of a potential interaction between gonadotropins and the GnRH system in the growth regulation of normal ovarian surface epithelium and its neoplastic counterparts.