Livinは、ユビキチン - プロテアソーム経路によるSMAC/Diabloの分解を促進します

アポトーシスタンパク質（IAP）ファミリーの阻害剤のメンバーであるLivinは、単一のバシュロウイルスIAPリピート（BIR）ドメインとCOOH末端の薬指ドメインを含むタンパク質をコードします。リビンは、BIRドメインを介してin vivoでin vitroでカスパーゼ-3および-7と-7と直接相互作用し、SMAC/DIABLOによって負に調節されることが報告されています。それにもかかわらず、その抗アポトーシス機能の根底にある詳細なメカニズムはまだ完全に特徴付けられていません。このレポートでは、LivinがSMAC/Diabloの分解を標的とするためのE3ユビキチンリガーゼとして機能することができるという証拠を初めて提供します。リビンのBIRドメインと薬指ドメインの両方が、in vitroおよびin vivoでのこの分解に必要です。また、リビンは生細胞で4時間未満の半減期を持つ不安定なタンパク質であることを示しています。Livinのリングドメインは自動統合を促進しますが、BIRドメインは分解阻害活性を示す可能性があります。Livin BIRドメインの突然変異は、その不安定性を大幅に向上させ、SMAC/Diabloへの結合を無効にし、抗アポトーシス阻害の減少をもたらします。私たちの発見は、リビンの新しい機能を提供します。それは、ユビキチン - プロテアソーム経路を介して、極めて重要なアポトーシス調節因子SMAC/ディアブロを分解するためにE3ユビキチンリガーゼ活性を示します。

Livin, a member of the inhibitor of apoptosis protein (IAP) family, encodes a protein containing a single baculoviral IAP repeat (BIR) domain and a COOH-terminal RING finger domain. It has been reported that Livin directly interacts with caspase-3 and -7 in vitro and caspase-9 in vivo via its BIR domain and is negatively regulated by Smac/DIABLO. Nonetheless, the detailed mechanism underlying its antiapoptotic function has not yet been fully characterized. In this report, we provide, for the first time, the evidence that Livin can act as an E3 ubiquitin ligase for targeting the degradation of Smac/DIABLO. Both BIR domain and RING finger domain of Livin are required for this degradation in vitro and in vivo. We also demonstrate that Livin is an unstable protein with a half-life of less than 4 h in living cells. The RING domain of Livin promotes its auto-ubiquitination, whereas the BIR domain is likely to display degradation-inhibitory activity. Mutation in the Livin BIR domain greatly enhances its instability and nullifies its binding to Smac/DIABLO, resulting in a reduced antiapoptosis inhibition. Our findings provide a novel function of Livin: it exhibits E3 ubiquitin ligase activity to degrade the pivotal apoptotic regulator Smac/DIABLO through the ubiquitin-proteasome pathway.