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Journal of microbiological methods2006Nov01Vol.67issue(2)

Pseudomonas putida KT2440からのMCL-PHAのアセトン抽出

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文献タイプ:
  • Journal Article
  • Research Support, Non-U.S. Gov't
概要
Abstract

Pseudomonas putidaから中鎖長のポリ-3-ヒドロキシアルカン酸(MCL-PHA)の抽出のための方法論が開発されました。MCL-PHAを含む乾燥P. putidaバイオマスを20容量のメタノールで5分間洗浄した後、10容量のアセトンのソックスレット抽出を5時間洗浄した場合、ほぼすべてのPHAを回収できずに回収できると判断されました。分子量。PHAの量を含むバイオマスは、PHAを含むバイオマスよりも溶媒抽出ステップでは、前処理ステップではメタノールが少なくなりました。アセトンでPHAを再溶解し、冷たいメタノールで再脂質化することにより、さらなる精製を実現できます。241および275 nmのUV分光法は、製品の純度の兆候として使用できます。

Pseudomonas putidaから中鎖長のポリ-3-ヒドロキシアルカン酸(MCL-PHA)の抽出のための方法論が開発されました。MCL-PHAを含む乾燥P. putidaバイオマスを20容量のメタノールで5分間洗浄した後、10容量のアセトンのソックスレット抽出を5時間洗浄した場合、ほぼすべてのPHAを回収できずに回収できると判断されました。分子量。PHAの量を含むバイオマスは、PHAを含むバイオマスよりも溶媒抽出ステップでは、前処理ステップではメタノールが少なくなりました。アセトンでPHAを再溶解し、冷たいメタノールで再脂質化することにより、さらなる精製を実現できます。241および275 nmのUV分光法は、製品の純度の兆候として使用できます。

A methodology was developed for the extraction of medium-chain-length poly-3-hydroxyalkanoates (mcl-PHA) from Pseudomonas putida. It was determined that if dry P. putida biomass containing mcl-PHA was washed in 20 volumes of methanol for 5 min followed by Soxhlet extraction in 10 volumes of acetone for 5 h, almost all of the PHA could be recovered with no detectable loss of molecular weight. Biomass containing higher amounts of PHA required less methanol during the pretreatment step but more acetone in the solvent extraction step than biomass containing less PHA. Further purification could be achieved by redissolving the PHA in acetone and reprecipitating in cold methanol. UV spectroscopy at 241 and 275 nm could be used as an indication of product purity.

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