小胞体ストレスの指標としてのスプライスされたXBP1 mRNAの定量的測定

展開されたタンパク質応答（UPR）イベントは、小胞体（ER）に展開されたタンパク質の蓄積によって引き起こされ、IRE1、ATF6、およびPERKによって媒介される3つのUPRシグナル伝達経路を活性化します。活性化されたIRE1によって誘導されるスプライシングXBP1 mRNAは、BIP発現を誘導する強力な転写因子であるタンパク質に変換されます。XBP1は、活性化されたATF6によっても誘導されます。したがって、ERストレスに応じてIRE1とATF6シグナル伝達の両方を反映する重要なマーカーであると考えられています。XBP1遺伝子発現の定量的測定のために、XBP1 mRNAのスプライスされた型と非スプライシング型を区別することが重要です。リアルタイムPCRを使用してスプライシングXBP1 mRNAを検出する新しい方法を開発し、結果をERストレス誘導性遺伝子BIPの発現の測定と比較しました。スプライスされたXBP1発現とBIP発現の間に良好な相関が見つかりました。したがって、私たちの方法は、ERストレスの単純かつ定量的な評価に役立つかもしれません。

The unfolded protein response (UPR) events triggered by the accumulation of unfolded protein in endoplasmic reticulum (ER) activate the three UPR signaling pathways mediated by IRE1, ATF6 and PERK. Spliced XBP1 mRNA induced by activated IRE1 is translated to the protein, a potent transcription factor that induces BiP expression. XBP1 is also induced by activated ATF6. It is thus thought to be an important marker reflecting both IRE1 and ATF6 signaling in response to ER stress. For quantitative measurement of XBP1 gene expression, it is important to distinguish between the spliced and non-spliced form of XBP1 mRNA. We have developed a new method to detect the spliced XBP1 mRNA by means of real-time PCR and we compared the result with measurements of the expression of the ER stress inducible gene BiP. A good correlation was found between spliced XBP1 expression and BiP expression. Thus, our method may be useful for simple and quantitative evaluation of ER stress.