リボ核タンパク質粒子におけるCis-perferential Line-1逆転写酵素活性

LINE-1レトロトランスポゾン（L1S）はヒトDNAの約17％を構成し、その活性はゲノムの進化に影響を与え続けています。レトロトランスポジションに適したヒトL1Sは、その移動性（ORF1PおよびORF2P）に必要な2つのタンパク質をエンコードします。ただし、ORF2Pに関連する生化学的活性は、細胞で検出するのが困難です。ここでは、L1 RNA、Orf1p、およびOrf2pが推定リボ核タンパク質の逆転移中間体に初めて共局在することを示します。さらに、ORF2PがエンコードRNAを逆転写のテンプレートとして優先的に使用することを実証します。したがって、我々のデータは、L1逆転写酵素のシス効率的な作用をサポートする最初の生化学的証拠を提供します。

LINE-1 retrotransposons (L1s) constitute approximately 17% of human DNA, and their activity continues to affect genome evolution. Retrotransposition-competent human L1s encode two proteins required for their mobility (ORF1p and ORF2p); however, biochemical activities associated with ORF2p have been difficult to detect in cells. Here, we show for the first time the colocalization of L1 RNA, ORF1p and ORF2p to a putative ribonucleoprotein retrotransposition intermediate. We further demonstrate that ORF2p preferentially uses its encoding RNA as a template for reverse transcription. Thus, our data provide the first biochemical evidence supporting the cis-preferential action of the L1 reverse transcriptase.