原発性ヒト肝細胞における薬物感知受容体を活性化する生体異物による副鼻腔および門脈肝薬物輸送体の発現の微分調節

正弦波および門脈肝薬物輸送体は、肝臓からの薬物除去に関与する重要な要因を構成します。アリール炭化水素受容体（AHR）、構成的アンドロスタン受容体（CAR）、妊娠X受容体（PXR）、および核因子E2関連因子2（NRF2）などの異種センサーの活性化を介したそれらの発現の調節は、不完全な特性化のままです。したがって、本研究は、ダイオキシンにさらされた原発性ヒト肝細胞の主要な薬物輸送体の発現を慎重に分析するように設計されました（2,3,7,8-テトラクロロジベンゾ-P-ジオキシン、TCDD）（AHR活性化因子）、リファンピシン（RIF）（APXR活性化因子）、フェノバルビタール（PB）（カーアクティベーター）、およびOltipraz（OPZ）（NRF2アクティベーター）、主に逆転写リアルタイムポリメラーゼ連鎖反応アッセイを使用します。MRNAレベルの1.5倍の因子変化に対応するしきい値は、MDR1、MRP2、BCRPなどの排出トランスポーターのうち少なくとも3つの独立したヒト肝細胞培養で観察され、PB、RIF、およびOPZによってアップレギュレートされました。OPZとRIFによって誘導されました。MDR1およびBCRPの発現は、流入輸送体OATP-CのTCDDおよびRIF熟成mRNAレベルによっても増加しました。胆汁酸輸送体、すなわち、胆汁塩輸出ポンプとNa（+） - タウロコール酸コトラン配流ポリペプチド、および正弦波輸送体であるOAT2は、すべてのテストされた化学物質によってダウンレギュレートされました。OCT1、OATP-B、OATP8などの流入輸送体は、PBおよびTCDDによって抑制されました。PBはMRP6発現も減少させたが、OCT1およびOATP8のmRNAレベルはそれぞれRIFとOPZによってダウンレギュレートされた。まとめると、これらのデータは、応答性の個人間変動に加えて、ヒト肝細胞における生体異物による輸送体調節の複雑なパターンを確立します。これは、薬物薬物の相互作用と肝薬物の悪影響に関してさらに注意に値するかもしれません。

Sinusoidal and canalicular hepatic drug transporters constitute key factors involved in drug elimination from liver. Regulation of their expression via activation of xenosensors, such as aryl hydrocarbon receptor (AhR), constitutive androstane receptor (CAR), pregnane X receptor (PXR), and nuclear factor E2-related factor 2 (Nrf2), remains incompletely characterized. The present study was therefore designed to carefully analyze expression of major drug transporters in primary human hepatocytes exposed to dioxin (2,3,7,8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin, TCDD) (an AhR activator), rifampicin (RIF) (a PXR activator), phenobarbital (PB) (a CAR activator), and oltipraz (OPZ) (a Nrf2 activator), using mainly reverse transcription-real time polymerase chain reaction assays. With a threshold corresponding to a 1.5-fold factor change in mRNA levels, observed in at least three of seven independent human hepatocyte cultures, efflux transporters such as MDR1, MRP2 and BCRP were up-regulated by PB, RIF, and OPZ, whereas MRP3 was induced by OPZ and RIF. MDR1 and BCRP expression was also increased by TCDD- and RIF-augmented mRNA levels of the influx transporter OATP-C. Bile acid transporters, i.e., bile salt export pump and Na(+)-taurocholate cotransporting polypeptide, and the sinusoidal transporter, OAT2, were down-regulated by all the tested chemicals. Influx transporters such as OCT1, OATP-B, and OATP8 were repressed by PB and TCDD. PB also decreased MRP6 expression, whereas mRNA levels of OCT1 and OATP8 were down-regulated by RIF and OPZ, respectively. Taken together, these data establish a complex pattern of transporter regulation by xenobiotics in human hepatocytes, in addition to interindividual variability in responsiveness. This may deserve further attention with respect to drug-drug interactions and adverse effects of hepatic drugs.