びまん性皮膚線維症におけるアデノシンA2A受容体：ヒト皮膚線維芽細胞および強皮症のマウスモデルにおける病原性の役割

目的：アデノシンは炎症と組織の修復を調節し、アデノシンA2A受容体はコラーゲンマトリックスの産生を刺激することにより創傷治癒を促進します。したがって、アデノシンA2A受容体が皮膚線維症の病因に寄与するかどうかを調べました。 方法：一次ヒト皮膚線維芽細胞によるコラーゲン産生は、リアルタイムポリメラーゼ連鎖反応、14Cプロリンの取り込み、およびSircolアッセイによって分析されました。皮膚コラーゲン産生の細胞内シグナル伝達は、MEK-1の阻害剤とERKリン酸化の実証を使用して調査されました。in vivo効果は、アデノシンA2A受容体欠損野生型の同腹剤マウス、C57BL/6マウス、およびアデノシンA2A受容体拮抗薬で処理したマウスを使用して、ブレオマイシン誘発性皮膚線維症モデルで研究されました。形態計測の特徴とヒドロキシプロリンのレベルは、皮膚線維症の測定値として決定されました。 結果：アデノシンA2A受容体占有率は、アデノシンA2Aによってブロックされたが、A1またはA2Bの受容体拮抗作用ではなく、原発性ヒト皮膚線維芽細胞によるコラーゲン産生を促進しました。アデノシンA2A受容体結紮はERKリン酸化を刺激し、皮膚線維芽細胞によるA2A受容体媒介コラーゲン産生をMEK-1阻害剤によってブロックしました。アデノシンA2A受容体欠損およびA2A受容体拮抗薬治療マウスは、ブレオマイシン誘発性皮膚線維症の発生から保護されました。 結論：これらの結果は、アデノシンA2A受容体が皮膚線維症の病因に積極的な役割を果たすことを示しており、強皮症などの疾患における皮膚線維症の治療と予防における新しい治療標的を示唆しています。

OBJECTIVE: Adenosine regulates inflammation and tissue repair, and adenosine A2A receptors promote wound healing by stimulating collagen matrix production. We therefore examined whether adenosine A2A receptors contribute to the pathogenesis of dermal fibrosis. METHODS: Collagen production by primary human dermal fibroblasts was analyzed by real-time polymerase chain reaction, 14C-proline incorporation, and Sircol assay. Intracellular signaling for dermal collagen production was investigated using inhibitors of MEK-1 and by demonstration of ERK phosphorylation. In vivo effects were studied in a bleomycin-induced dermal fibrosis model using adenosine A2A receptor-deficient wild-type littermate mice, C57BL/6 mice, and mice treated with adenosine A2A receptor antagonist. Morphometric features and levels of hydroxyproline were determined as measures of dermal fibrosis. RESULTS: Adenosine A2A receptor occupancy promoted collagen production by primary human dermal fibroblasts, which was blocked by adenosine A2A, but not A1 or A2B, receptor antagonism. Adenosine A2A receptor ligation stimulated ERK phosphorylation, and A2A receptor-mediated collagen production by dermal fibroblasts was blocked by MEK-1 inhibitors. Adenosine A2A receptor-deficient and A2A receptor antagonist-treated mice were protected from developing bleomycin-induced dermal fibrosis. CONCLUSION: These results demonstrate that adenosine A2A receptors play an active role in the pathogenesis of dermal fibrosis and suggest a novel therapeutic target in the treatment and prevention of dermal fibrosis in diseases such as scleroderma.